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Acción microbicida del agua de plata en muestras de agua de riego del río Pachanlica - provincia de Tungurahua
(PUCE - Quito, 2015) Puente Balda, María Belén; Granda Moreno, Elena Isabel
El riego es indispensable en la agricultura, pues a nivel mundial una cuantiosa cantidad de alimentos provienen de la agricultura de regadío. En el Ecuador, la mayor parte del agua proviene de recursos hídricos superficiales como son los ríos y más de la mitad del agua disponible se utiliza en el riego de cultivos. La problemática recae en que varios recursos hídricos a nivel nacional y en especial en la provincia de Tungurahua tienen altos niveles de contaminación; por lo que, el agua utilizada para el riego no es la adecuada y esto está directamente relacionado con la calidad de productos que se obtiene. Adicionalmente, muchos de los productos de cultivados en Tungurahua son distribuidos para todo el país. Para tener una visión general de la contaminación que puede tener el agua de riego se evaluó la cantidad de microorganismos indicadores, los estándares de calidad se basan en estos grupos de microorganismos. Varios productos son utilizados para la desinfección del agua, siendo uno de estos la plata; la cual se ha empleado con este propósito desde la antigüedad. En el presente estudio se evaluó la capacidad del agua de plata a tres diferentes concentraciones de 4 ppm, 10 ppm y 15 ppm y con tres tiempo de contacto (15, 30 y 60 minutos) para inhibir las bacterias indicadoras (mesófilos aerobios, coliformes totales / Escherichia coli y enterobacterias) presentes en muestras de agua de riego de 16 acequias del río Pachanlica de la provincia de Tungurahua. El estudio permitió conocer que la concentración de 10 ppm a 15 minutos de tiempo de contacto fue la mejor para inhibir crecimiento del grupo de mesófilos aerobios, mientras que para coliformes totales, E. coli y enterobacterias la mejor concentración fue la de 4 ppm a los 15 minutos de tiempo de contacto. En conclusión, el presente estudio evidenció que la plata tiene una potente actividad microbicida.
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Aislamiento y evaluación de la viabilidad de cianobacterias de la Rizósfera de plantas leguminosas cultivadas en la parroquia Poaló, Latacunga – Cotopaxi.
(PUCE - Quito, 2014) Martínez Pérez, Raquel Estefanía; Morales Avendaño, Ever Darío
En el Ecuador, los recursos agrícolas representan una parte importante del potencial económico, de ahí que el uso de biofertilizantes representan una alternativa para la sustitución de fertilizantes químicos pues estos proporcionan mayor rentabilidad económica, aumentan la productividad de los cultivos, reducen los efectos de la fertilización química sobre el medio ambiente y la salud. Es por eso que en el presente trabajo se reporta la evaluación de consorcios con cianobacterias aisladas de suelos agrícolas para determinar su viabilidad y su potencial biofertilizante. Las cianobacterias se aisladaron en medio sólido BG11o, de muestras tomadas de leguminosas completas con su raíz y rizósfera, cultivadas en la Parroquia Poaló ubicada al noroeste de la ciudad de Latacunga, Provincia de Cotopaxi. Las cianobacterias fijadoras de nitrógeno aisladas fueron Nostoc sp., Anabaena sp. y Calothrix sp. De la fase de escalamiento de los consorcios con estas cianobacterias se obtuvo un volumen final de 45 L, a partir del cual se cosechó la biomasa, producto de la sedimentación del cultivo, en un volumen de 1.125 L. Previa a la inoculación de los diferentes tratamientos se realizó un análisis físico-químico del suelo en donde se obtuvo que el porcentaje de materia orgánica era de 1.93%, nitrógeno 0.10%, fósforo 49.6 ppm, y azufre 13.08 ppm. Posteriormente se inocularon 12 bandejas con 2 kg de suelo cada una, procedente del mismo lugar de donde fueron aisladas las cianobacterias, cada una con cuatro tratamientos: testigo (400 mL de agua destilada), fertilizante químico (400 mL), consorcio de cianobaterias (250 mL de consorcio + 150mL de agua destilada) y fertilizante químico + consorcio de cianobacterias (125 mL de consorcio +75 mL de agua destilada). Los resultados de las evaluaciones de nutrientes de los diferentes tratamientos evidenciaron que la combinación de consorcio de cianobacterias y fertilizante químico brindó el contenido más alto de materia orgánica, N y S con 4.5%, 0.23% y 109.8 ppm respectivamente. El segundo contenido más alto de materia orgánica, N y S se reportó en el tratamiento con el consorcio de cianobacterias con 2.2 %, 0.11% y 90.2 ppm respectivamente. Se establece un protocolo para la producción y mantenimiento de consorcios con cianobacterias fijadoras de nitrógeno, medio de cultivo y condiciones de escalado de los cultivos discontinuos. La conformación de consorcios cianobacterias- microalgas en biotecnología agrícola permite ampliar el espectro de microorganismos utilizados en biofertilización de suelos.
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Análisis de superficies con identificación de cepas nativas de quirófano, cuartos de recuperación y baños, mediante la técnica de hisopado de superficies, entes y después del uso de desinfectantes en la Clínica de Unidades Médicas de la ciudad de Quito
(PUCE - Quito, 2015) Naranjo Plaza, María de Lourdes; Granda Moreno, Elena Isabel
Dentro del ambiente clínico, la desinfección es de gran importancia para llevar a cabo una atención de calidad al paciente, previniendo toda clase de posibles infecciones de origen nosocomial que puedan afectar a su salud. El presente estudio tiene la finalidad de analizar las áreas de mayor importancia dentro de la Clínica de Unidades Médicas, desagregándola en sub-áreas, en la medida del grado de contacto que los pacientes tienen con aquellas, lo que permitió clasificarlas como ideales para el análisis. Una vez escogidas, éstas se sometieron a comprobación del estado de asepsia y eficacia del desinfectante. Posteriormente, se dividió la toma de muestras en dos fases pre-analíticas: una antes de la desinfección y otra después de la desinfección tomando en cuenta que para los dos casos no podían ser alterados los hábitos normales de asepsia dentro de la Clínica. El análisis estadístico, fue determinante como instrumento de apoyo para el ensayo, y sus resultados arrojaron el hecho comprobado de que en la primera etapa de su aplicación, la carga bacteriana se incrementó después de la desinfección. A continuación, en la segunda etapa del muestreo se hizo una corrección en la metodología de limpieza general de la Clínica y los resultados reflejan una reducción de la carga bacteriana total, manteniendo el incremento después de la desinfección. Las cepas para el control de los medios de cultivo utilizados corresponden a los siguientes microorganismos: Escherichia coli, Candida albicans nativas.
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Biodiversidad fúngica endófita y epífita de Citrus sinensis, naranjo dulce, de dos localidades de la Región Litoral del Ecuador
(PUCE - Quito, 2016) Moya Maldonado, Alexandra Elizabeth; Yánez Altuna, Jeniffer Marcela
La naranja dulce, Citrus sinensis, es cultivada y comercializada en todo el mundo. La biodiversidad fúngica endófita y epífita de esta especie vegetal proveniente de dos localidades de la región litoral del Ecuador fue investigada. Un total de 96 muestras (hojas sanas, frutos sanos y frutos con presencia de lesiones superficiales) de la localidad de Quevedo-Los Ríos y El Empalme-Guayas, fueron procesadas en los laboratorios de la Escuela de Bioanálisis de la Pontificia Universidad Católica del Ecuador. Cuarenta y nueve hongos tanto endófitos como epífitos se aislaron. Para la identificación molecular, se realizaron extracciones de ADN y secuenciaciones de la región ITS de los genes ribosomales. Mediante la herramienta BLAST se comparó las secuencias del estudio con las del Banco de Genes del NCBI, de esta forma se identificaron treinta y tres hongos a nivel de género y se obtuvieron 18 especies distintas. Tanto en la micobiota endófita como epífita, Epicoccum sp. fue el género más abundante. E. nigrum fue la especie epífita más aislada; mientras que Fusarium sp. fue el segundo género endófito más frecuente. La diversidad de hongos endófitos y epífitos fue determinada utilizando los índices ecológicos: Riqueza de especies, Margalef, Shannon-Viewer, Simpson y Jaccard. La localidad de Quevedo posee una mayor riqueza de especies y un índice de Margalef mayor (4.6). Además, los resultados sugieren que Quevedo posee alta heterogeneidad (H`=2.58) mientras que la localidad de El Empalme muestra una dominancia de especies mayor (D= 0.18) especialmente del hongo Epicoccum nigrum. Únicamente tres especies fueron compartidas por las dos localidades Epicoccum nigrum, Epicoccum sp. y Leptosphaerulina chartarum (Ij=0,38). Este estudio demuestra que, Citrus sinensis está constituido por micobiota endófita y epífita variada. El análisis filogenético basado en el método Neighbor- Joining generó un dendograma con Ascomycota como grupo general y cinco grupos internos pertenecientes a la subdivisión Pezizomycotina.
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Caracterización de la resistencia a los carbapenémicos de acinetobacter SPP. a partir de aislados clínicos y ambientales de la ciudad de Quito, Ecuador, 2016
(PUCE - Quito, 2016) Sotomayor Ávila, Nicole Elizabeth; Bayas Rea, Rosa de los Ángeles
I RESUMEN Acinetobacter spp. son considerados como patógenos oportunistas responsables de infecciones asociadas a la atención de la salud. Las especies del género Acinetobacter se caracterizan por presentar una alta resistencia a los carbapenémicos; por lo que, se han convertido en un mayor problema de salud pública a nivel mundial. El presente estudio tuvo como objetivo principal caracterizar la resistencia a los carbapenémicos de Acinetobacter spp. a partir de aislados clínicos y ambientales de la ciudad de Quito. Para el estudio, se incluyó aislados clínicos provenientes del Instituto Nacional de Investigación en Salud Pública, los mismos que fueron reactivados en agar sangre de cordero. Por otro lado, se colectó muestras ambientales de cinco ríos, Machángara, Monjas, Pita, San Pedro y Guayllabamba, las mismas que fueron sembradas en el medio selectivo CHROM AGAR para el aislamiento de Acinetobacter spp. La identificación de los aislados ambientales se realizó mediante pruebas automatizadas (VITEK-2) y bioquímicas como catalasa, oxidasa y motilidad. Los aislados clínicos y ambientales fueron sujetos a la prueba de sensibilidad antibiótica mediante el método de difusión en disco en agar Muller Hinton; para lo cual, se usaron doce antibióticos de acuerdo a las recomendaciones del Instituto de Estándares de Laboratorio y Clínicos. Para la determinación fenotípica de las enzimas metalo-β-lactamasas y serin-β-lactamasas se realizó la prueba de monodiscos de EDTA y ácido borónico, respectivamente. Por otro lado, el análisis molecular consistió en extracción del ADN mediante ebullición, amplificación y secuenciación de nueve genes de resistencia a los carbapenémicos, seis genes que codifican para las serin-β-lactamasas, blaGES, blaOXA-23, blaOXA-24, blaOXA-51, blaOXA-58 y blaOXA-143 y tres que codifican para las metalo-β-lactamasas, blaSPM, blaSIM y blaGIM. Finalmente, las relaciones filogenéticas de los genes blaOXA-23, blaOXA-24, blaOXA-51 y blaOXA-143 fueron evaluadas mediante inferencia bayesiana. Como resultado, en los aislados ambientales se identificó principalmente Acinetobacter baumannii y el complejo A. calcoaceticus/A. baumannii; de los cuales, el 50 % de los aislados fueron resistentes a imipenem. Por otro lado, todos los aislados clínicos de Acinetobacter spp. presentaron una alta resistencia a imipenem y meropenem. Además, los genes blaOXA-23 y blaOXA-51 fueron los más predominantes en aislados clínicos; mientras que, el gen blaOXA-51 fue el más frecuente en aislados ambientales. De acuerdo a los análisis estadísticos, no se encontró diferencias significativas (p < 0,05) entre los genes blaOXA-51 provenientes de aislados clínicos y ambientales. En base a la similaridad de las secuencias, se identificó los genes blaOXA-23, blaOXA-51, blaOXA-143 y blaOXA-72. De las cuales, el gen blaOXA-143 presentó una alta similaridad con la secuencia de la variante OXA-499 reportada para A. pittii. Mientras que, el gen blaOXA-72 fue idéntico a la secuencia de la variante OXA-72 reportada previamente en el país; del mismo modo, el gen blaOXA-23 fue similar con secuencias de la variante OXA-23 disponibles en el Genbank. Por otro lado, en el gen blaOXA-51 se identificó al menos cinco haplotipos, tres de aislados clínicos y dos de aislados ambientales, que no han sido reportados anteriormente. Finalmente, todos los genes blaOXA se originan de un mismo ancestro en común; en particular, los haplotipos del gen blaOXA-51 de aislados ambientales se agruparon con secuencias de origen clínico.
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Caracterización fenotípica y genotípica del bacteriófago 5Q18 activo contra Escherichia coli enteropatógena multirresistente
(PUCE - Quito, 2016) Egas Vivero, Pablo Roberto; Bayas-Rea, Rosa de los Ángeles
Escherichia coli enteropatógena (ECEP) es un patotipo de E. coli relacionado con diarreas infecciosas que afectan especialmente a niños. En el Ecuador, las diarreas de tipo infecciosa representan la sexta causa de muerte. El abuso de antibióticos para tratar diferentes tipos de infecciones ha generado multirresistencia por parte de las bacterias, lo cual se ha vuelto un serio problema de salud pública. Esta situación ha causado una escases de antibióticos eficaces, por lo que, la fagoterapia resulta ser una alternativa para el tratamiento de bacterias multirresistentes en los países occidentales. El presente estudio tuvo como objetivo la caracterización fenotípica y genotípica del bacteriófago 5Q18 con actividad lítica contra ECEP multirresistente. Para lo cual se colectó muestras de agua del río Machángara con el fin de aislar un fago con actividad lítica. Una vez que se aisló el fago se lo tituló mediante el ensayo de doble agar con la cepa ECEP 14 multirresistente. La actividad lítica contra ECEP 14 se evaluó mediante la cinética de lisis del fago. Por otro lado, la caracterización morfológica del fago 5Q18 se realizó mediante microscopía de transmisión electrónica; mientras que, para la caracterización molecular se purificó el ADN del fago en base a dos metodologías: i) un protocolo modificado y ii) el kit Wizard® Genomic DNA Purification kit de Promega. Después, el ADN fue cortado con la enzima de restricción XbaI para determinar el tipo de material genético. Finalmente se realizó un ensayo de actividad in vitro con dos tratamientos y tres repeticiones para comprobar la actividad lítica del fago contra ECEP 14. Como resultados de la microscopía de transmisión electrónica se determinó que el bacteriófago 5Q18 pertenece a la familia Myoviridae del orden Caudovirales con un genoma de 20 Kb. Además se encontró que el fago tiene un amplio espectro de actividad lítica frente a miembros de la especie E. coli tanto comensal como a dos patotipos, ECEP y ECEH; en particular, contra la cepa ECEP 14 multirresistente. La actividad bactericida del fago 5Q18 sobre ECEP 14 fue más alta que el ácido láctico que se usa como preservante en la industria alimenticia. En conclusión, en base a los equipos y materiales disponibles en el país se pudo caracterizar al fago 5Q18. Además, debido a las características que presenta este fago se lo puede considerar como un agente biocontrolador de E. coli enteropatógena multirresistente, por lo que, el fago podría ser aplicado en la industria alimenticia.
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Caracterización molecular y análisis filogenético de hongos microscópicos asociados a manchas foliares en hojas de uvilla (Physalis peruviana L.) en varias localidades del cantón Quito, Pichincha.
(PUCE - Quito, 2016) Díaz Granda, José Luis; Yánez Altuna, Jeniffer Marcela
Los cultivos de uvilla (Physalis peruviana L.) son susceptibles a diversos factores físicos, químicos y biológicos que afectan a varias estructuras de la planta, principalmente a las hojas. En Ecuador se han identificado morfológicamente a los hongos responsables de patologías en el tejido foliar sin llegar a nivel de especie. En este trabajo se caracterizó molecularmente hongos microscópicos aislados de manchas foliares en hojas de uvilla en el cantón Quito. Además, se realizó un análisis filogenético mediante la aplicación de los métodos de Neighbor joining (NJ), Maxima Verosimilitud e Inferencia Bayesiana para dar un mayor soporte a la identificación. La identificación molecular de 130 aislados de microhongos se realizó mediante la amplificación de la región ITS (Espaciadores Internos Transcritos) del ADN ribosomal. Las secuencias de ADNr obtenidas fueron comparadas con aquellas disponibles en el GenBank del NCBI mediante el uso de la herramienta BLAST, obteniendo porcentajes de identidad de 97 a 100%. Como resultado, se identificaron 41 especies distintas de microhongos pertenecientes al phylum Ascomycota. Los hongos Alternaria sp., A. tenuissima, Epicoccum nigrum, Diaporthe sp., Xylaria multiplex y Colletotrichum brevisporum fueron aislados en cantidades mayores que las demás. El género Alternaria cuenta con el mayor número de especies, las cuales están asociadas a patologías en la hoja de uvilla. El análisis filogenético utilizó como matriz las secuencias de los aislados y secuencias de GenBank para la generación de dos árboles filogenéticos. El árbol Bayesiano resultante fue el mejor en cuanto a topología y valores de soporte (≥0,95).
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Cocientes lipoproteicos y su relación con factores de riesgo cardiovascular en pacientes con dm-2 atendidos en las asociaciones de diabéticos de la ciudad de Quito, 2011
(PUCE - Quito, 2014) Oviedo Bascones, Andrea Mireya; Manrique Báez, Gabriel Mauricio; Andrade Heredia, Sandra Patricia
Introducción: La Diabetes Mellitus tipo 2 (DM2) es considerada una de las patologías más frecuentes en nuestro país y un factor de riesgo independiente para enfermedad cardiovascular, asociada además a la alteración del metabolismo lipídico, contribuyendo al desarrollo de la ECV. Actualmente los clínicos y los epidemiólogos están enfocados en los proyectos que involucran las dislipidemia aterogénica en el diabético apoyándose en el valor que puedan tener los índices o cocientes aterogénicos como predictores de ECV o como medios para controlar los tratamientos para dislipidemias y evitar el progreso de la enfermedad arterioesclerótica. Objetivo: Establecer la relación de los distintos cocientes lipoproteicos y C-no HDL con factores de riesgo cardiovascular (FRCV) en pacientes con DM-2 que fueron atendidos en las distintas Asociaciones de diabéticos de la ciudad de Quito en el 2011. Muestra, materiales y métodos: Participaron 195 pacientes, varones y mujeres, que cumplieron los criterios de inclusión, pertenecientes a la Asociación de diabéticos de la ciudad de Quito. Se cuantificaron los niveles de lípidos sanguíneos: colesterol total y triglicéridos por método enzimático colorimétrico (Dade Behring/Dimension AR), separación de lipoproteinas y cuantificación del colesterol por electroforesis en gel de agarosa y densitometría (Quick Gel/Helena/SPIFE); se tomaron las medidas antropométricas y se recogieron los datos necesarios del historial médico de cada paciente. Con la información de las variables se trabajó la estadística descriptiva, la prueba de normalidad de Kolmogorov-Smirnov ( = 0,05) y la relación de variables con la correlación lineal de Pearson (a = 0,05) y la regresión lineal múltiple ( = 0,05). Resultados: Se estudiaron a 48 varones y 147 mujeres, con una edad promedio de 63 años. En las variables no lipídicas como FRCV se encontró: que el 72,3% presentan obesidad, y que el mayor porcentaje de hipertensión arterial en la muestra pertenece al género masculino con el 16,7%; en cuanto a las variables lipídicas el 51,8% presenta hipercolesterolemia, el 52,3%, hipertrigliceridemia mientras que el 12,8% de los pacientes presentan niveles bajos de C-HDL y el 60% de los pacientes con niveles elevados de C-LDL. De acuerdo a los cocientes lipoproteicos, el porcentaje más alto de pacientes con valores sobre los puntos de corte corresponden al C-no-HDL con el 64,6% seguido por el índice TG/C-HDL con el 47,1%, CT/C-HDL, 24,9% y C-LDL/C-HDL, con el 21,1%. La relación de variables lipídicas y no lipídcas con estos índices quedó conformada de acuerdo a cada índice: Cno- HDL 149,2 47,1 (p TG, C-LDL=0,000), CT/C-HDL 3,4 1,9 (p PAS, TG, C-LDL=0,000), C-LDL/C-HDL 2,1 1,1 (p PAS, TG, CT=0,000), TG/C-HDL 4,1 6 (p PAS, EDAD=0,000). Conclusiones y Recomendación: Los resultados de estudio indican que el cálculo de estos índices aterogénicos, la estimación del C-no-HDL se convierten en herramientas de utilidad clínica para la prevención y el tratamiento de ECV de manera especial para la población diabética que se sabe cuentan con probabilidades altas de presentar ECV.
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“Como los cambios hormonales fisiológicos de la mujer, estilo de vida, medios externos y la genética influyen en el desarrollo del cáncer de mama”
(PUCE - Quito, 2017) Rivera Orquera, Eliana Carolina; Albornoz Garzón, Nora Ximena
El cáncer de mama constituye un problema muy severo a nivel de todo el mundo. Según la OMS representa el 16% de los cánceres en mujeres, además del 69% de defunciones en países en vías de desarrollo son por esta causa, la OPS el 47% de las muertes por cáncer de mama se produjeron en América Latina, es por tal motivo que la OMS y sus filiales como la Sociedad Panamericana de la Salud destinan gran cantidad de presupuesto e infraestructura a la difusión y la búsqueda de alternativas de prevención; sin embargo en Latinoamérica la frecuencia es baja se presume que es debido al mestizaje que se ha dado en la región (OMS, 2016) En contraste en el Ecuador el padecimiento va en aumento “la tasa de mortalidad ha subido de 7,1% en el quinquenio 1986-1990 a 9,2 en 1996-2000, disminuyendo muy ligeramente a 9,1% en el 2001-2005”. (Quiroz, 2016) En la actualidad se ha observado un incremento en las neoplasias, la ciudad de Quito es desde el año 2008, la que más casos de cáncer de mama ha presentado, ya que 36 de cada 100.000 mujeres presentaron neoplasias mamarias. (Agencia Publica de Noticias del Ecuador y sudamerica, 2014). Sin embargo, las causas no han sido determinadas plenamente y se considera necesaria la determinación de los agentes causales como método preventivo para el cáncer de mama.
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Comparación de Inmunofluorescencia Indirecta y ELISA para la determinación de anticuerpos contra Neospora caninum en sueros bovinos recolectados en fincas de las provincias de Pichincha, Bolívar y Santo Domingo de los Tsáchilas
(PUCE - Quito, 2011) Vargas Ramos, Carla Verónica; Escobar Sarabia, María Daniela; García Gaybor, Letty Magdalena
La neosporosis bovina es una enfermedad parasitaria provocada por un protozoario parásito intracelular llamado Neospora caninum que es prevalente en todos los continentes. La enfermedad se caracteriza por provocar lesiones neuromusculares graves y causar aborto tanto en ganado lechero como del productor de carne originando pérdidas económicas cuantiosas, motivo por el cual es necesaria su vigilancia. El objetivo del presente trabajo fue buscar la concordancia entre las técnicas Enzyme Linked Inmunosorbent Assay (ELISA) e Inmunofluorescencia Indirecta (IFI). Se tomó como prueba de referencia diagnóstica a la técnica IFI (VMRD) en la detección de anticuerpos contra Neospora caninum. Se determinó la sensibilidad (S), la especificidad (E), el valor predictivo de un resultado positivo (VPRP) y el valor predictivo de un resultado negativo (VPRN) de la técnica enzimoinmunoensayo. Se evaluaron 343 sueros de bovinos de diferentes haciendas de las zonas de Pintag (Prov. de Pichincha), Alluriquín (Prov. de Santo Domingo de los Tsáchilas) y Salinas (Prov. de Bolívar). Las muestras fueron facilitadas por el proyecto Seroprevalencia de enfermedades reproductivas bovinas de la Pontificia Universidad Católica del Ecuador (SERB-PUCE II). Las técnicas ELISA competitiva e inmunofluorescencia indirecta se realizaron en el Laboratorio Veterinario de la PUCE. Mediante el cálculo del valor kappa se obtuvo un k= 0,89. La técnica de ELISA tuvo una S de 100 % y E de 95 %, VPRP de 85 % y un VPRN de 100%. Las prevalencias encontradas para Neospora caninum fueron de 27,1 % mediante la técnica de ELISA, y el 23% mediante la técnica de IFI. Se concluyó que la concordancia entre ELISA e IFI fue muy alta, es decir que la fuerza de concordancia es casi perfecta, pese a que los kits usan antígenos no nativos del Ecuador.
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Comparación de la eficiencia entre las escalas de evaluación de Allred e índice H para expresión de receptores de estrógenos y progesterona por inmunohistoquímica en carcinoma ductal invasor de la glándula mamaria
(PUCE - Quito, 2012) Arellano Ramírez, Andrea Cristina; Báez Flores, Juan Gabriel; Rodríguez Jaramillo, Ruth Elizabeth
La inmunohistoquímica en nuestro país tiene un desarrollo aproximado de 15 años, y es la metodología más difundida para evaluar la presencia de RE y RP. En la mayoría de los Servicios de Patología se usan el Índice H y el Porcentaje de Positividad para la evaluación de receptores hormonales en cáncer de mama, este sistema requiere de tiempo y meticulosidad por parte del evaluador, dicha escala de evaluación ha demostrado ser muy eficaz. Una reciente innovación es la introducción del índice de Allred, el cual lleva menos de dos años practicándose en nuestro medio, sin que se haya establecido sus ventajas comparativas con el método convencional de interpretación. En este estudio se validó un sistema de evaluación de pruebas de laboratorio con un estudio correlacional – transversal para la comparación de la eficiencia de la utilización de las Escalas de Allred e Índice H, con las cuales se valora la presencia de receptores de estrógenos y progesterona mediante técnicas de inmunohistoquímica. Se analizaron 90 casos que han sido procesados y diagnosticados como Carcinomas Ductales Invasores en el Servicio de Patología del Hospital Oncológico Solón Espinosa Ayala, durante el año 2009. Dichos casos fueron reevaluados por tres patólogos, uno del Hospital Oncológico “Solón Espinosa”, otro del Hospital “Carlos Andrade Marín” y un Patólogo independiente, todos ellos aplicaron el mismo sistema de escala de Allred y el Índice H, en un sistema de ciego, donde se alternó las laminillas histológicas, sin poder correlacionarlas ni conocer los resultados ya establecidos entre los evaluadores. El promedio de edad de las 90 mujeres cuyos tumores fueron analizados fue de 56 años, con un rango entre 20 y 85 años, con sólo dos casos (2.2%) por debajo de los 35 años. Se establecieron 13 casos (14.5%) de tumores bien diferenciados, SBR I, 61 casos (67.7%) de tumores moderadamente diferenciados SBR II y 16 pacientes (17.7%) con tumores SBR III. Se observó una evolución favorable de las pacientes con el tratamiento en 50 casos (55.55), desfavorable en 32 casos (35.55%) y fallecimiento en 8 casos (8.9%), correspondiendo al 9.8% de las pacientes con SBR II y 12.5% de las pacientes con SBR III. Se ubicaron a 10 (11.11%) pacientes en estadío clínico I; 8 (8.88%) en estadío clínico II; 21 (23.33%) en estadío III y 7 (7.77%) en estadío clínico IV, según la extensión del tumor determinado por la escala internacionalmente validada TNM. Sin embargo, no se pudo clasificar al 49% de las pacientes. Se observó una evolución desfavorable en el 60% de las mujeres estadío I, 25% de las que estaban en estadío II, 14% de las de estadío III y 56% de las de estadío IV, estableciéndose una sobrevida promedio de 2 años 3 meses, que disminuye a 1 año 6 meses cuando el SBR es III, o menos de 1 año cuando el estadío clínico es IV, con una clara incidencia de estos dos factores en la mortalidad y la respuesta terapéutica, en cuatro años de seguimiento (2007-2011). La razón por la que se pretende hacer una evaluación del paciente en la supervivencia parte de la observación, de que pacientes tratados con la misma técnica operatoria, con las mismas o semejantes terapias coadyuvantes, evolucionan en forma diferente, lo que induce a pensar en la existencia de factores que determinen que el pronóstico sea favorable o desfavorable en este tipo de neoplasias, pudiendo ser en nuestro país el principal factor la adherencia al tratamiento, este se refiere al cumplimiento y constancia para mejorar la calidad de vida, es decir, tomar la medicación de acuerdo con la dosificación y el programa prescrito; para evitar la persistencia.
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Comparación de la utilidad diagnóstica entre las técnicas punción aspiración con aguja fina (PAAF) y biopsia core en el diagnóstico de neoplasias malignas en la glándula tiroides.
(PUCE - Quito, 2016) Santamaría Naranjo, Ana Cecilia; Albornoz Garzón, Nora Ximena
El Instituto Nacional de Cáncer de los Estados Unidos (NCI) ha estimado que 60.220 personas (14.910 hombres y 45.310 mujeres) serían diagnosticadas con cáncer de tiroides en 2015. A pesar de que este tipo de cáncer tiene un buen pronóstico, se estima que 1.850 personas podrían morir por este tipo de cáncer en los Estados Unidos. El diagnóstico mediante biopsia es considerado parte importante de la evaluación de pacientes con nódulos tiroideos sospechosos de malignidad. La biopsia percutánea de tiroides es fácil de realizar, tiene un bajo costo y con muestras adecuadas de tejido, tomadas bajo guía ecográfica, ha logrado mejorar la certeza diagnóstica en este tipo de patología. En la actualidad, se busca técnicas de diagnóstico que permitan reducir al mínimo el porcentaje de muestras no diagnosticadas, complicaciones post biopsia, en las cuales la concordancia entre el diagnóstico dado por la biopsia y el resultado definitivo histopatológico se correspondan. Existen en la actualidad dos tipos de técnicas, las mismas que se realiza con dos tipos de aguja, aguja fina (PAAF) o aguja gruesa o cortante (CORE). Este estudio tiene como objetivo determinar cuál de las dos técnicas preliminares punción aspiración con aguja fina PAAF y la biopsia CORE presenta mayor grado de efectividad y exactitud en el diagnóstico de neoplasias malignas en nódulos tiroideos. Se puede concluir que la punción aspiración con aguja fina (PAAF) guiada por ecografía es aun considerada como el método Gold estándar ya que es una técnica precisa, eficaz y segura para la evaluación preoperatoria de los nódulos tiroides. La biopsia CORE puede tener un papel complementario al de la punción aspiración con aguja fina, especialmente en los nódulos tiroideos con diagnóstico citológico poco concluyente ayudando de esta manera a reducir al mínimo los procedimientos invasivos innecesarios, ya que la biopsia CORE presenta un porcentaje mayor de posibles complicaciones, sobre todo con aquellos nódulos que se encuentran en áreas anatómicas muy complejas o que son de un pequeño tamaño.
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Comparación de los marcadores de infección (PCR, temperatura corporal, eritrosedimentación y leucograma) en pacientes de terapia intensiva del Hospital Eugenio Espejo de junio - agosto del 2009
(PUCE - Quito, 2011) Luna Vega, Beatriz del Rocío; Rodríguez Anangonó, Daniel Alejandro; Pérez, Alfredo
Se efectúa un estudio para determinar que la utilización de la Proteína C Reactiva hs es un marcador biológico de alta importancia como pronóstico de los procesos infecciosos e inflamatorios en la Unidad de Terapia Intensiva en la ciudad de Quito, el cual fue realizado en el transcurso de tres meses que corresponden desde junio- agosto del año 2009. Se tomó un total de 140 muestras de pacientes mayores a 16 años de edad. El estudio se lo ejecutó en el Hospital Eugenio Espejo” Quito. Las determinaciones de la Proteína C Reactiva se realizó por medio del método PCR (LATEX) hs. Los resultados obtenidos en esta investigación, indican que la Proteína C Reactiva es un marcador muy sensible, el cual fue comparado con otros marcadores de infección, presentando los resultados esperados para el PCR, por tanto se demuestra que es una prueba útil y necesaria. Ya que puede elevarse rápidamente ante una infección independientemente del diagnóstico del paciente, lo que no ocurre con otros marcadores como: la temperatura corporal y la velocidad de sedimentación globular.
Open Access
Comparación de los recuentos de las placas Petrifilm TM ec/coliformes para la determinación de coliformes totales y e. coli con el medio m-coliblue24 para análisis de agua potable
(PUCE - Quito, 2011) Ramos Endara, Johanna Alexandra
El presente estudio tiene como finalidad buscar una alternativa de adaptación en el ensayo establecido para el análisis de coliformes totales y E. coli en agua potable, para reemplazar el medio de cultivo empleado en el método de filtración por membrana (m-Coliblue24), con la utilización de las 3M placas Petrifilm EC (E. coli – coliformes). Comparando los resultados obtenidos así como también todos los pasos previos a la realización del ensayo. Para la comparación se eligió un rango A (alto), Rango B (medio) y Rango C (bajo), la determinación de cada uno de los rangos, se tomó como base los recuentos preestablecidos por la casa comercial Millipore para el recuento de coliformes totales entre 20 y 80, E. coli entre 20 y 60; se utilizaron un total de 180 muestras; 60 en cada uno de los rangos y 30 para cada uno de los medios.
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Comparación del coprocultivo vs la Técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) convencional para la detección de Salmonella Typhi en muestras fecales
(PUCE - Quito, 2013) Espinoza Proaño, Daniela Alexandra; Iza Segovia, Estefanía Edith; Escalante Vanoni, Luis Santiago
Existen métodos tradicionales para identificar Salmonella Typhi que consisten en el empleo de medio de cultivo los cuales permiten la recuperación de dicho microorganismo, para luego realizar el aislamiento en medios selectivos, la identificación bioquímica y caracterización serológica, por lo que estos métodos pueden llegar a ser muy dispendiosos y de esta manera consumen mucho tiempo. Esta tesis busca comparar resultados obtenidos en el coprocultivo vs los resultados obtenidos en la PCR y la relación de sensibilidad y especificidad que presenta cada técnica para así poder dar a conocer cuál sería la más apropiada para poder llegar a un diagnóstico en un corto tiempo. Para la extracción del ADN se utilizó el kit comercial E.Z.N.A. Stool de la casa comercial OMEGA. Se realizó una PCR multiplex para la identificación de género mediante la amplificación de los siguientes genes: Grupo D (antígeno somático), fliC-d (antígeno flagelar) y wcdB (antígeno capsular) los cuales son propios de Salmonella Typhi. Para desarrollar este estudio se analizó un total de 144 muestras fecales, que fueron inoculadas artificialmente con cepas de S.Typhi conocidas y posteriormente fueron analizadas simultáneamente mediante técnicas de cultivo tradicionales y de biología molecular (PCR) para comparar datos y analizar la sensibilidad y especificidad de cada uno de los métodos. Del total de muestras se divide en tres grupos de 48, cada grupo es contaminado con concentraciones conocidas de S.Typhi de 300, 150 y 50 UFC lo cual permitirá seleccionar el inóculo más adecuado para el trabajo posterior. Con el estándar que se obtenga una mejor sensibilidad se procede a contaminar un total de 50 muestras, 25 de Salmonella
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Control microbiológico de cosméticos elaborados artesanalmente en base de productos naturales en la ciudad de Quito
(PUCE - Quito, 2012) Andrade Estévez, Ana Carolina; Valdiviezo Aguilar, Ana Belén; Granda Moreno, Elena Isabel
Se considera un producto artesanal elaborado ya sea, totalmente a mano o con la ayuda de herramientas manuales o incluso medios mecánicos, con la contribución manual directa del artesano como el componente más importante del producto acabado. Los productos artesanales se producen sin limitación y utilizando materias primas procedentes de recursos sostenibles. En el presente trabajo de investigación se analizaron muestras de cosméticos de elaboración artesanal de dos lugares del centro de Quito, a los cuales se los ha denominado como “Fabricante 1” y “Fabricante 2”, con el fin de chequear la seguridad para los consumidores de estos productos, por el riesgo que corren cuando estos no son manejados con los cuidados microbiológicamente esenciales. Los resultados encontrados fueron: los productos del Fabricante 1 presentaron un 100% de contaminación en comparación con los productos del Fabricante 2 en donde no se obtuvo presencia de microorganismos patógenos. Las muestras analizadas corresponden a: loción, mascarilla, crema y colirio. Las pruebas microbiológicas requeridas en cosméticos son: Recuento total Mesófilos Aerobios, Recuento de Mohos y Levaduras, Ausencia/Presencia de Staphylococcus aureus, Ausencia/Presencia de Pseudomonas aeruginosa, Ausencia/Presencia Burkholderia cepacia, Ausencia/Presencia de Coliformes totales. Escherichia coli, Ausencia/Presencia de Candida albicans. Se trabajó con el kit comercial COSMETIKIT de la casa comercial Microkit, el cual se basa en la Norma UNE-EN-ISO 16140:2003; el mismo que nos brindó el material adecuado para la realización de los análisis.
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Correlación de los resultados del examen químico y microscópico de muestras de orina y del urocultivo en pacientes hospitalizados del hospital “Carlos Andrade Marín” de la ciudad de Quito, 2012
(PUCE - Quito, 2014) Jumbo Jima, Diana Rosario; Sobrevilla Arias, Dana Estefanía; Paredes Miño, Ximena Alexandra
Las infecciones del tracto urinario (ITU) constituyen una de las patologías infecciosas más frecuentes en la comunidad y en el ámbito hospitalario, siendo uno de los problemas médicos de mayor importancia. Su prevalencia aumenta más en mujeres que en hombres, debido a que existen factores de riesgo predisponentes como factores biológicos, genéticos, alteraciones anatómicas, funcionales e inmunológicas. Por lo cual se realizó un estudio descriptivo en el Hospital Carlos Andrade Marín (HCAM) de la ciudad de Quito, en donde se analizaron 160 muestras de orina de pacientes hospitalizados en los cuales se solicitaron Urocultivo para correlacionar los parámetros del EMO con el Urocultivo. El EMO se lo realizó en tres partes; el análisis físico, químico, y microscópico, el primero se lo efectuó de forma manual, el químico de manera automatizada en el equipo Urysis 2400, en donde se tomaron en cuenta los parámetros de leucocitos y nitritos y para el análisis microscópico se procesaron las muestras en el equipo UF-1000i, en el cual se recogieron los valores de leucocitos y bacterias. Para el Urocultivo aislamos las colonias, hicimos un recuento cuantitativo e identificamos los uropatógenos más comunes en pacientes hospitalizados del HCAM, haciendo un reconocimiento presuntivo de cepas BLEE. En las muestras analizadas se encontró que el 63% de solicitudes de Urocultivo corresponden a mujeres, y se demostró que con mayor frecuencia se da el diagnostico de ITU en el servicio de obstetricia siendo el 25.6%. De las muestras analizadas los Urocultivos positivos fueron el 29%, en los cuales la bacteria más frecuente fue E. coli. Dentro de las E. coli encontradas el 14.89% fueron cepas presuntivas para BLEE. La correlación existente entre el EMO y Urocultivo se determinó mediante Regresión múltiple, en donde las variables independientes X o explicativas son: leucocitos, nitritos (tira reactiva) y bacterias (análisis microscópico) y siendo la variable Y o dependiente el Urocultivo. Obteniendo una correlación del 81% que corresponde a una correlación positiva, lo que indica que ambas variables aumentan o disminuyen simultáneamente
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Correlación diagnóstica del estudio de bloques celulares y extendidos citológicos obtenidos mediante punción aspiración por aguja fina de nódulos tiroideos y la determinación de la utilidad del marcador de proliferación Ki67 por inmunohistoquímica en el Hospital Carlos Andrade Marín de la ciudad de Quito en los años 2012-2013
(PUCE - Quito, 2013) Insua Macías, María Gabriela; Albornoz Garzón, Nora Ximena
La incidencia y prevalencia del cáncer de tiroides está en aumento a nivel mundial y en el Ecuador sobretodo en la zona andina. En ese tiempo se utilizan diferentes técnicas para el diagnóstico previo a la tiroidectomía, la prueba de oro es la punción aspiración por aguja fina con la que se hacen comúnmente extendidos citológicos, además se pueden realizar bloques celulares que nos sirven para estudios de inmunohistoquímica, como el Ki67 que es un marcador de proliferación celular. En este estudio se utilizaron 116 muestras de punción aspiración de nódulos tiroideos de pacientes que acudieron al servicio de Imagenología del Hospital Carlos Andrade Marín de la ciudad de Quito y que cumplieron los criterios ecográficos de ser únicos, sólidos y vascularizados. De estas muestras se obtuvieron extendidos citológicos y bloques celulares que se estudiaron y diagnosticaron de acuerdo al Sistema Bethesda, obteniendo la concordancia de ambas técnicas; luego se eligieron aleatoriamente 40 muestras que fueron sometidas a la inmunotinción con Ki67. Los nódulos tiroideos se presentaron con mayor prevalencia en el género femenino (82,8%) y en el rango de edad entre los 50 y 69 años (58,6%). La concordancia entre la punción aspiración con aguja fina y el bloque celular fue del 76.7% y el índice estadístico de Kappa fue de 0,5, que indica una concordancia moderada. El marcador Ki67 no fue útil en el diagnóstico diferencial de los nódulos tiroideos en las muestras obtenidas en este estudio, ya que su lectura fue baja en todos los casos. Las tiroiditis presentan mayor marcaje en la inmunotinción con Ki67 debido a la gran proliferación de linfocitos. El bloque celular puede evidenciar resultados que se escapan al análisis citológico y mejorar la sensibilidad y la especificidad; adicionalmente el procesamiento y estudio del bloque celular es un método simple y que permite realizar pruebas especiales después de revisar los extendidos citológicos.
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Correlación diagnóstica entre punción aspiración por aguja fina (PAAF) y elastosonografía en tiempo real (RTE) de nódulos tiroideos en pacientes del Hospital “Carlos Andrade Marín – Quito, 2011
(PUCE - Quito, 2012) Carrión Delgado, Linda Soledad; Vásconez Pazmiño, Emma Lucila
El estudio diagnóstico de los nódulos tiroideos cumple un papel preponderante en la detección de enfermedades tiroideas y de neoplasias tanto benignas como malignas. La punción aspiración por aguja fina (PAAF) es una técnica utilizada y validada hace varias décadas en la práctica clínica siendo considerada como el estándar de oro en el diagnóstico de los nódulos tiroideos y en la selección de los pacientes que requieren un tratamiento quirúrgico. La Elastosonografía en tiempo real (RTE) de reciente uso, tiene de acuerdo a múltiples reportes, una alta correlación con los diagnósticos realizados por la PAAF y ayuda a seleccionar una mejor muestra, en el momento mismo de la punción con aguja fina, ya que el operador redirige la toma hacia el sitio más probable de lesión maligna.1 El presente trabajo investigativo tuvo por objeto correlacionar en forma pionera en nuestro medio hospitalario, los diagnósticos citológicos luego de realizar la PAAF con los diagnósticos de la RTE. Para el efecto se realizó un estudio transversal que involucró a los servicios de Patología, Rayos X e Imagenología del Hospital Carlos Andrade Marín, empleando una muestra no aleatoria correspondiente a 200 pacientes consecutivos que acudieron a realizarse una PAAF guiada por ecografía de nódulos tiroideos, de los cuales se descartaron a 9 pacientes por ausencia de datos clínicos, con una muestra final de 191 casos. Los casos incluidos en el estudio fueron registrados en una matriz estructurada que incluyó: género y edad del paciente, datos ecográficos (localización del nódulo tiroideo, tamaño, ecotextura, ecogenicidad, calcificaciones y vascularidad), los diagnósticos de la RTE y los diagnósticos citológicos.
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Demostración de la importancia en la expresión de los marcadores de inmunohistoquímica ki67 y p53 en pacientes femeninas con diagnóstico de carcinoma invasor de mama
(PUCE - Quito, 2016) Erazo Moreano, Ximena Carolina; Albornoz Garzón, Nora Ximena
El cáncer de mama es un problema que ha afectado a millones de mujeres en Ecuador, América Latina y el mundo entero. Siendo una de las enfermedades con mayor tasa de mortalidad en todo el mundo y que actualmente se utilizan métodos de detección temprana y oportuna para lesiones de la glándula mamaria como el autoexamen realizado por la misma paciente y que si hubiere alguna anomalía detectada se lo complementará con estudios de imagen que ayudarán a un mejor detalle de la lesión. Aquí se hablará de la importancia que posee en Inmunohistoquímica ki67 y p53 en el carcinoma invasor de mama como marcadores pronósticos que ayudarán a diagnosticar el avance de la lesión. Dando una gran importancia al tratamiento con una mejor respuesta ante terapias y convirtiéndose en una enfermedad que se creía mortal a una enfermedad totalmente curable en muchos de los casos. Siendo de esta manera indispensable para el médico patólogo el incorporar a su panel de pruebas de IHQ los marcadores ki67 y p53 obteniendo grandes resultados favorables para la paciente