Tesis - Licenciatura en Microbiología (Sin Restricción)

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Browsing Tesis - Licenciatura en Microbiología (Sin Restricción) by Author "Costales Cordero, Jaime Alfredo"

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    Efecto antimicrobiano de péptidos sintéticos obtenidos a partir de la piel de anuros ecuatorianos sobre bacterias multirresistentes
    (PUCE - Quito, 2023) Nuñez Santana, Camila Micaela; Costales Cordero, Jaime Alfredo
    Los antibióticos tradicionales están perdiendo efectividad frente a bacterias multirresistentes, las cuales se producen por el uso excesivo e inapropiado de agentes antibacterianos y por una selección natural de cepas bacterianas resistentes. Estas bacterias son cada vez más comunes y representan una amenaza para la salud mundial. El Sistema Mundial de Vigilancia de la Resistencia a los Antimicrobianos emitió un informe en 2018 que mostraba que las principales bacterias que presentan una mayor resistencia a los antimicrobianos son Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae y Mycobacterium tuberculosis. Esto ha planteado la necesidad de encontrar nuevas soluciones para combatir estas infecciones. En este estudio, se analizó la actividad de dos péptidos antimicrobianos frente a S. aureus resistente a la oxacilina (C-ORSA), E. coli productora de betalactamasas de espectro extendido (BLEE), K. pneumoniae portadora del gen KPC (K. pneumoniae carbapenemasa) y Serratia marcescens. Estos péptidos antimicrobianos son una alternativa innovadora para el tratamiento de infecciones causadas por bacterias multirresistentes. Los péptidos antimicrobianos son moléculas naturales o sintéticas que poseen una amplia actividad inhibitoria contra una gran variedad de microorganismos, incluyendo bacterias, virus, hongos y protozoos. Además, existe una baja probabilidad de que las bacterias desarrollen resistencia en comparación con los antibióticos tradicionales. El estudio utilizó la metodología de la Mínima Concentración Inhibitoria (MIC) y una prueba hemolítica. Se realizaron ensayos en placas de microdilución de 96 pocillos, con 10 diluciones de los péptidos, siendo 512 µg/ml la más alta y 1 µg/ml la más baja. Se realizaron 7 repeticiones por triplicado de cada ensayo para asegurar la repetitividad y la reproducibilidad de los resultados. Los hallazgos demostraron que los péptidos Dermaseptina sp7 y Dermaseptina sp10 exhibieron actividad inhibitoria frente a S. aureus (C-ORSA) y E. coli (BLEE), a concentraciones de 64 32 µg/m y 32 µg/m de MIC respectivamente, mientras que sobre K. pneumoniae y S. 10 marcescens no mostraron esta actividad. Estos péptidos no son citotóxicos para los eritrocitos. Estos resultados sugieren que la Dermaseptina SP7 y la Dermaseptina SP10 podrían ser una opción terapéutica prometedora para tratar infecciones causadas por bacterias S. aureus y E. coli multirresistentes.
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    Evaluación de la actividad antimicrobiana de péptidos sintéticos derivados de la piel de anfibios ecuatorianos
    (PUCE - Quito, 2023) Herrera Acurio, Francis Andrea; Costales Cordero, Jaime Alfredo
    Las infecciones causadas por microorganismos multirresistentes representan un grave problema de salud pública en todo el mundo. Entre las bacterias que producen estas infecciones se encuentran Staphylococcus aureus resistente a la oxacilina (C-ORSA), Escherichia coli productora de betalactamasas de espectro extendido (BLEE), Klebsiella pneumoniae productora de carbapenemasa (KPC) y Serratia marcescens. La resistencia de estas bacterias a los antibióticos existentes evidencia la necesidad de buscar nuevas alternativas de tratamiento. Los péptidos antimicrobianos (AMPs) son un conjunto de biomoléculas con alto potencial debido a sus mecanismos de acción contra bacterias. En este artículo se evaluó la efectividad de los péptidos Dermaseptina SP5 y SP9 derivados de la piel de Agalychnis spurrelli frente a aislados clínicos de las bacterias resistentes antes mencionadas. Se determinó la Concentración Mínima Inhibitoria (MIC) de estos péptidos. Además, se realizó una prueba hemolítica para determinar el grado de hemólisis de cada uno de los péptidos. Los resultados mostraron que los péptidos no tuvieron efecto inhibitorio en S. aureus, K. pneumoniae y S. marcescens. Sin embargo, se observó un efecto inhibitorio en E. coli, con una dependencia de la concentración de los péptidos. Los resultados sugieren que la resistencia observada puede deberse a estrategias desarrolladas por las bacterias para evitar la actividad de los AMPs. También se evaluó el grado de hemólisis de Dermaseptina SP9, demostrando su capacidad para no dañar las membranas celulares. En general, se concluyó que las Dermaseptinas SP5 y SP9 tienen potencial como agentes antimicrobianos, pero se necesita más investigación para comprender sus mecanismos de acción y efectividad contra una amplia gama de bacterias resistentes.
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    Evaluation of the activity of bispirazoles against recombinant Trypanosoma cruzi strains expressing ß-galactosidase
    (PUCE - Quito, 2023) Galarza Jarrín, Ambar Nicol; Costales Cordero, Jaime Alfredo
    Background: Nifurtimox and benznidazole are the only drugs currently approved to treat Chagas disease, caused Trypanosoma cruzi. However, they display unsatisfactory efficacy and induce undesirable side effects. Therefore, identifying new compounds with specific activity against T. cruzi is of great interest.Methods. The in vitro activity of twenty-five bispirazoles was evaluated against intracellular amastigotes of the recombinant Tulahuen ß-gal strain of T. cruzi. Their cytotocicity against mammalian cells was evaluated via resazurin reduction assays. BNZ was used as a reference drug.Results: In the initial two repetitions of the screen, one bispirazole (2X) presented specific in vitro activity against T. cruzi, with an IC50 value of 3,416 µM and no measurable cytotoxicity at concentrations up 100 µM. BNZ, employed as reference drug, displayed a IC50 of 4,23 µM and a CC50 up to 100 µM. Compound 2X´s activity was not reproducible in subsequent replicates.Conclusions: One evaluated compound was selectively toxic against intracellular T. cruzi amastigotes in vitro and did not show cytotoxic activity against mammalian cells. Its IC50 value is comparable to those obtained for BNZ, the reference drug. Further studies are warranted to confirm the anti-T. cruzi activity of compound 2X.
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    Evaluation of the in vitro anti-T.cruzi activity of four antimicrobial peptides from Ecuadorian anurans
    (PUCE - Quito, 2023) Ramos Dussling, Eloy Dylon; Costales Cordero, Jaime Alfredo
    Background: Chagas disease (CD) caused by Trypanosoma cruzi, is considered the most important parasitic disease in the Americas. It is estimated to affect approximately 8 million people, 30% of which will develop the debilitating and potentially fatal health complications as a result. Infection by T. cruzi can be cured if treatment with benznidazole or nifurtimox is administered shortly after the infection occurs. However, treatment efficacy decreases over time, making treatment of chronic Chagas disease challenging. Additionally, these drugs frequently induce side effects. Antimicrobial peptides (AMPs), biologically active molecules produced by organisms through their innate immune system, are of considerable interest for developing new antimicrobial therapies. Methods. The anti-T. cruzi activity of four antimicrobial peptides derived from the gliding tree frog, Agalychnis spurrelli, was studied. Synthetic versions of adenoregulin- AS1 (ADN-AS1), dermatoxin-AS1 (DTX-AS1), dermaseptin-SP9 (DRS-SP9), and dermaseptin-SP10 (DRS-SP10) were tested in vitro against trypomastigotes of the recombinant Tula-ß-gal T. cruzi strain via colorimetric assays. The cytotoxicity of the peptides against mammalian cells was also evaluated, using rezasurin reduction assays. Results: The four studied peptides exhibited varying degrees of activity against T. cruzi tripomastigotes, the parasite forms infective to mammals, including humans. Three peptides (DTX-AS1, DRS-SP10, and ADN-AS1) displayed activity against the parasite (EC50 = 0,35, 1,21 and, 1,58 µM, respectively) with limited cytotoxic effects over mammalian host cells. DRS-SP9, conversely, displayed much lower (EC50 = 22, 91µM) activity. Conclusions: These findings suggest the studied peptides are active against T. cruzi trypomastigotes. Dermatoxina-AS1 (DTX-AS1) displays the most specific activity against the parasite. Although our data suggest peptides are lytic for the parasite, additional studies are required to clarify their mechanism of action.