Aislamiento de consorcio bacteriano de la fuente termal de Pucará, perteneciente al cantón Urcuquí - Imbabura para la lixiviación de cobre del proyecto tipo A "Biosensores"

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Date
2019-07
Journal Title
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Volume Title
Publisher
Pontificia Universidad Católica del Ecuador Sede Ibarra
Abstract
The objective of the research was to isolate a native strain from the thermal waters of Pucará, Urcuquí, Imbabura, capable of leaching copper without the need to use conventional methods, for which three sampling points were established in the thermal water sources of the study area: main reservoir (P1), secondary reservoir (P2) and slope attached to the river (P3), of which the respective physico-chemical analysis was carried out, having as main results a pH of 5.9, a temperature of 40 ° C and a copper concentration of 3.2 mg.l-1, which served as experimental base for its replication in the laboratory. In the experimental phase, the bacterial consortiums were isolated, using Petri dishes with LB agar, replicating the conditions of the medium, to characterize the existing strains by their size, shape and color, where 36 different strains were found which were transferred to tubes of LB Invitrogen broth assay under extreme conditions of 100 mg.l-1 copper, a pH of 3.3 and the same temperature, where 7 copper-resistant strains could be found, identified by DNA extraction and the polymerase chain reaction, sending to Macrogen for its respective sequencing and identification. Copper concentrations were measured at 24, 48 and 72 hours by acid digestion of water for the total of recoverable or dissolved metals for analysis by spectroscopy, with an optimum retention time of 48 hours in which two strains leached a maximum of 81% (Thermothelomyces thermophilus) and 78% (Spirochaeta thermophila).
Description
La investigación tuvo como objetivo el aislar una cepa nativa de las aguas termales del Pucará, Urcuquí, Imbabura, capaz de lixiviar el cobre sin la necesidad de utilizar métodos convencionales, para lo cual se establecieron tres puntos de muestreo en las fuentes de agua termal de la zona de estudio: reservorio principal (P1), reservorio secundario (P2) y vertiente anexa al río (P3), de los cuales se realizó el respectivo análisis físico-químico, teniendo como principales resultados un pH de 5,9, una temperatura de 40°C y una concentración de cobre de 3,2 mg.l-1, mismos que sirvieron como base experimental para su replicación en laboratorio. En la fase experimental se aislaron los consorcios bacterianos, utilizando cajas Petri con agar LB, replicando las condiciones del medio, para caracterizar las cepas existentes por su tamaño, forma y color, en donde se encontraron 36 cepas diferentes las cuales se pasaron a tubos de ensayo con caldo LB Invitrogen bajo condiciones extremas de 100 mg.l-1 de cobre, un pH de 3,3 y la misma temperatura, en donde se pudo hallar 7 cepas resistentes a cobre, identificadas mediante la extracción de ADN y la reacción en cadena de polimerasa, enviando a Macrogen para su respectiva secuenciación e identificación. Se midió las concentraciones de cobre a las 24, 48 y 72 horas mediante la digestión ácida de aguas para el total de metales recuperables o disueltos para su análisis mediante espectroscopía, siendo el tiempo de retención optimo 48 horas en donde dos cepas lixiviaron un máximo de 81% (Thermothelomyces thermophilus) y 78% (Spirochaeta thermophila).
Keywords
Cobre, Lixiviación, Biosensores
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