Microbiología

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Evaluación del crecimiento de phellinus SPP en diferentes sustratos
(PUCE - Quito, 2010) Jativa, Hugo David; Oña Neacato, José Enrique; Egas Benavides, Josefina Gloria María
En el Parque Nacional Yasuní existe una gran biodiversidad de flora y fauna, la cual incluye a los organismos pertenecientes al reino fungi. Este proyecto se planteó realizar el cultivo in vitro de las cepa de Phellinus sp. encontradas en nuestra expedición por el Parque Nacional Yasuní; para esto se comparó el desarrollo de las cepas de este hongo según el sustrato utilizado en el medio de cultivo. Los sustratos utilizados fueron aserrín de álamo, aserrín de eucalipto, aserrín de roble y aserrín común. Los resultados reflejaron una variación significativa en el desarrollo analizando la productividad de las cepas utilizadas, mientras que no hubo una diferencia significativa entre los sustratos analizados, el medio agar extracto de malta fue en el que mejor desarrollo se obtuvo de las cepas de hongos.
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Obtención y propagación del inóculo primario de tres cepas de Ganoderma lucidum recolectada en la Estación Científica Yasuní-PUCE
(PUCE - Quito, 2010) Naranjo Zurita, Magdalena Cristina; Toro Villa, Lissette del Pilar; Granda Moreno, Elena Isabel
Se llevó a cabo la evaluación del comportamiento de tres cepas diferentes de Ganoderma lucidum frente a una mezcla de cereales como son trigo, cebada y centeno que fueron empleados para el inóculo primario tomando en cuenta condiciones controladas para los mismos como son temperatura, humedad y oscuridad para determinar la cepa más efectiva tanto en crecimiento como en peso.
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Uso de residuos celulósicos de la agroindustria para la producción de bioetanol
(PUCE - Quito, 2010) Vega Marín, Mario Alejandro; Luna Unda, Cecilia Verónica
La materia orgánica con alto contenido de celulosa ofrece gran potencial, como materia prima, para la elaboración de varios productos de interés industrial. Sin embargo su uso está restringido principalmente para la industria papelera y elaboración de carbón vegetal. La falta de uso de esta materia se debe principalmente a la recalcitrancia de la materia celulósica para lograr transformarla en sus componentes primarios, y a los costos que suponen transformarlos mediante procesos químicos. Una manera de utilizar esta materia, es usando procesos biológicos, puntualmente procesos enzimáticos que resultan mucho más baratos que los procesos químicos, con la ventaja de que no producen contaminación alguna. Un uso que se puede dar a la materia celulósica, y como alternativa ambiental utilizar residuos agroindustriales, es la elaboración de biocombustibles, como el bioetanol, para solucionar en parte el agotamiento de los recursos energéticos basados en petróleo, y enfrentar los problemas de contaminación ambiental.
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Evaluación de la prevalencia de Listeria monocytogenes en productos lácteos y embutidos en tres mercados de la ciudad de Quito mediante la técnica de la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real
(PUCE - Quito, 2010) Mena Palacios, María Carolina; Granda Moreno, Elena Isabel
La presencia de Listeria monocytogenes constituye un peligro para la salud pública, especialmente cuando se asocia con la ingesta de alimentos listos para consumo ya que mediante una dosis infectiva mínima (<100 UFC/g o mL de alimento) puede causar enfermedad en personas inmunodeprimidas, niños con algún grado de desnutrición, adultos mayores, embarazadas, entre otros grupos de riesgo y al considerar que tanto lácteos como embutidos son productos accesibles a la población y de frecuente consumo, surge la necesidad de evaluar la prevalencia de dicho microorganismo en lácteos y embutidos expendidos en tres mercados de la ciudad de Quito: Mayorista, San Roque e Iñaquito. Por lo cual, se analizaron 100 muestras de yogures y 100 muestras de salchichas obtenidos en dichos puntos de venta. La técnica empleada para el análisis fue la Reacción en Cadena de la Polimerasa en tiempo real (qPCR), la cual demuestra la presencia del fragmento de 106pb del gen hly que codifica para listeriolisina O. Se cuantificó de forma absoluta el producto de la amplificación de ácido desoxirribonucleico (ADN) y se utilizó SYBER Green I, técnica basada en el principio de emisión de fluorescencia del marcador que se une a los productos de la PCR, los cuales se identifican en base a la curva de temperatura de fusión (Tm) generada. Los resultados obtenidos fueron los siguientes: en yogures 4% y en salchichas el 9%, porcentajes relativamente altos considerando que son productos listos para la venta y de consumo masivo. Por tanto se sugiere la necesidad de implementar metodologías modernas que aseguren la ausencia de este microorganismo durante la fabricación de alimentos. La qPCR demostró ser una alternativa complementaria al cultivo ya que además de ser un método sencillo, genera resultados rápidos, que podrían emplearse para el análisis de rutina en los laboratorios de la industria de alimentos al incrementar el número de muestras examinadas optimizando así procesos de inspección y acción de los equipos de vigilancia en salud.
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Comparación de los recuentos de las placas Petrifilm TM ec/coliformes para la determinación de coliformes totales y e. coli con el medio m-coliblue24 para análisis de agua potable
(PUCE - Quito, 2011) Ramos Endara, Johanna Alexandra
El presente estudio tiene como finalidad buscar una alternativa de adaptación en el ensayo establecido para el análisis de coliformes totales y E. coli en agua potable, para reemplazar el medio de cultivo empleado en el método de filtración por membrana (m-Coliblue24), con la utilización de las 3M placas Petrifilm EC (E. coli – coliformes). Comparando los resultados obtenidos así como también todos los pasos previos a la realización del ensayo. Para la comparación se eligió un rango A (alto), Rango B (medio) y Rango C (bajo), la determinación de cada uno de los rangos, se tomó como base los recuentos preestablecidos por la casa comercial Millipore para el recuento de coliformes totales entre 20 y 80, E. coli entre 20 y 60; se utilizaron un total de 180 muestras; 60 en cada uno de los rangos y 30 para cada uno de los medios.
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Prevalencia de Streptococcus pneumoniae por medio de la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) en muestras nasofaríngeas de niños menores de 5 años de edad de la ciudad de Quito
(PUCE - Quito, 2011) Miranda Tapia, Gabriela Fernanda
Streptococcus pneumoniae es un importante colonizador de la nasofaringe, capaz de causar varias enfermedades. Principalmente afecta a niños menores de 5 años y a personas mayores de 60 años. Objetivos: Determinar la prevalencia de Streptococcus pneumoniae por medio de la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) en muestras nasofaríngeas de niños menores de 5 años de edad de la ciudad de Quito. Establecer la diferencia de la prevalencia al comparar las técnicas de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) frente al cultivo microbiológico convencional considerado como la prueba de referencia. Determinar la sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo, y valor predictivo negativo de la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) convencional frente al cultivo microbiológico.
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Comparación de los marcadores de infección (PCR, temperatura corporal, eritrosedimentación y leucograma) en pacientes de terapia intensiva del Hospital Eugenio Espejo de junio - agosto del 2009
(PUCE - Quito, 2011) Luna Vega, Beatriz del Rocío; Rodríguez Anangonó, Daniel Alejandro; Pérez, Alfredo
Se efectúa un estudio para determinar que la utilización de la Proteína C Reactiva hs es un marcador biológico de alta importancia como pronóstico de los procesos infecciosos e inflamatorios en la Unidad de Terapia Intensiva en la ciudad de Quito, el cual fue realizado en el transcurso de tres meses que corresponden desde junio- agosto del año 2009. Se tomó un total de 140 muestras de pacientes mayores a 16 años de edad. El estudio se lo ejecutó en el Hospital Eugenio Espejo” Quito. Las determinaciones de la Proteína C Reactiva se realizó por medio del método PCR (LATEX) hs. Los resultados obtenidos en esta investigación, indican que la Proteína C Reactiva es un marcador muy sensible, el cual fue comparado con otros marcadores de infección, presentando los resultados esperados para el PCR, por tanto se demuestra que es una prueba útil y necesaria. Ya que puede elevarse rápidamente ante una infección independientemente del diagnóstico del paciente, lo que no ocurre con otros marcadores como: la temperatura corporal y la velocidad de sedimentación globular.
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Prevalencia de Streptococcus pneumoniae en niños que acuden a centros infantiles y hospitalarios de la ciudad de Quito, en el periodo julio- septiembre del 2010
(PUCE - Quito, 2011) Pavón Mera, Evelyn Gabriela; Egas Benavides, Josefina Gloria María
Steptococcus pneumoniae es uno de los principales agentes causales de una gran variedad de cuadros clínicos, infecciones benignas como otitis media y sinusitis agudas, e infecciones severas como septicemia, meningitis y neumonía. La neumonía neumocócica es la principal causa de mortalidad entre los menores de cinco años. Esta patología se puede presentar debido a una previa infección vírica del tracto respiratorio superior en la que hubo daño suficiente de pulmones para permitir que los neumococos infecten la zona. Puede presentarse neumonía en individuos que han sido colonizados por Streptococcus pneumoniae, luego de la aparición de un factor de riesgo, produciendo una infección esporádica.
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Verificación de Procesos de Limpieza y Desinfección mediante el Análisis de Indicadores de Contaminación en las Superficies de Servicios Higiénicos de un Centro Comercial de la Ciudad de Quito
(PUCE - Quito, 2011) Vásconez Cadena, Daniela Alejandra; Acosta Gutiérrez, Lucía Gabriela
En el presente estudio se muestrearon 150 superficies de dos servicios higiénicos, para hombres y mujeres, ubicados dentro de un centro comercial de la ciudad de Quito para verificar los procesos de limpieza y desinfección. De las muestras recogidas con hisopos estériles de algodón sumergidos en caldo LPT, se transfirió 1ml en placas 3M Petrifilm para mesófilos aerobios, coliformes totales/Escherichia coli y se incubaron a 32-35° C durante 24-48 horas respectivamente, para determinar la cantidad de bacterias presentes en estas superficies. Las superficies muestreadas fueron: de la chapa interna de la cabina: 20 de mujeres y 12 de hombres, de la pared interna de la cabina: 20 de mujeres y 12 de hombres, de la palanca de flush: 20 de mujeres y 12 de hombres, del botón de grifería 18 de mujeres y 17 de hombres y del dispensador de jabón: 12 de mujeres y 7 de hombres. Los muestreos fueron realizados antes y después del proceso de limpieza y desinfección ejecutados por el personal de aseo. Posterior al análisis de los datos obtenidos en el laboratorio, se procedió a la implementación de medidas correctivas y recomendaciones mediante una capacitación expuesta a los jefes de mantenimiento y a miembros del personal de aseo. Finalmente se procedió a una segunda toma de muestras de verificación en las distintas superficies muestreadas anteriormente y se analizaron los datos.
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Comparación de Inmunofluorescencia Indirecta y ELISA para la determinación de anticuerpos contra Neospora caninum en sueros bovinos recolectados en fincas de las provincias de Pichincha, Bolívar y Santo Domingo de los Tsáchilas
(PUCE - Quito, 2011) Vargas Ramos, Carla Verónica; Escobar Sarabia, María Daniela; García Gaybor, Letty Magdalena
La neosporosis bovina es una enfermedad parasitaria provocada por un protozoario parásito intracelular llamado Neospora caninum que es prevalente en todos los continentes. La enfermedad se caracteriza por provocar lesiones neuromusculares graves y causar aborto tanto en ganado lechero como del productor de carne originando pérdidas económicas cuantiosas, motivo por el cual es necesaria su vigilancia. El objetivo del presente trabajo fue buscar la concordancia entre las técnicas Enzyme Linked Inmunosorbent Assay (ELISA) e Inmunofluorescencia Indirecta (IFI). Se tomó como prueba de referencia diagnóstica a la técnica IFI (VMRD) en la detección de anticuerpos contra Neospora caninum. Se determinó la sensibilidad (S), la especificidad (E), el valor predictivo de un resultado positivo (VPRP) y el valor predictivo de un resultado negativo (VPRN) de la técnica enzimoinmunoensayo. Se evaluaron 343 sueros de bovinos de diferentes haciendas de las zonas de Pintag (Prov. de Pichincha), Alluriquín (Prov. de Santo Domingo de los Tsáchilas) y Salinas (Prov. de Bolívar). Las muestras fueron facilitadas por el proyecto Seroprevalencia de enfermedades reproductivas bovinas de la Pontificia Universidad Católica del Ecuador (SERB-PUCE II). Las técnicas ELISA competitiva e inmunofluorescencia indirecta se realizaron en el Laboratorio Veterinario de la PUCE. Mediante el cálculo del valor kappa se obtuvo un k= 0,89. La técnica de ELISA tuvo una S de 100 % y E de 95 %, VPRP de 85 % y un VPRN de 100%. Las prevalencias encontradas para Neospora caninum fueron de 27,1 % mediante la técnica de ELISA, y el 23% mediante la técnica de IFI. Se concluyó que la concordancia entre ELISA e IFI fue muy alta, es decir que la fuerza de concordancia es casi perfecta, pese a que los kits usan antígenos no nativos del Ecuador.
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Control microbiológico de cosméticos elaborados artesanalmente en base de productos naturales en la ciudad de Quito
(PUCE - Quito, 2012) Andrade Estévez, Ana Carolina; Valdiviezo Aguilar, Ana Belén; Granda Moreno, Elena Isabel
Se considera un producto artesanal elaborado ya sea, totalmente a mano o con la ayuda de herramientas manuales o incluso medios mecánicos, con la contribución manual directa del artesano como el componente más importante del producto acabado. Los productos artesanales se producen sin limitación y utilizando materias primas procedentes de recursos sostenibles. En el presente trabajo de investigación se analizaron muestras de cosméticos de elaboración artesanal de dos lugares del centro de Quito, a los cuales se los ha denominado como “Fabricante 1” y “Fabricante 2”, con el fin de chequear la seguridad para los consumidores de estos productos, por el riesgo que corren cuando estos no son manejados con los cuidados microbiológicamente esenciales. Los resultados encontrados fueron: los productos del Fabricante 1 presentaron un 100% de contaminación en comparación con los productos del Fabricante 2 en donde no se obtuvo presencia de microorganismos patógenos. Las muestras analizadas corresponden a: loción, mascarilla, crema y colirio. Las pruebas microbiológicas requeridas en cosméticos son: Recuento total Mesófilos Aerobios, Recuento de Mohos y Levaduras, Ausencia/Presencia de Staphylococcus aureus, Ausencia/Presencia de Pseudomonas aeruginosa, Ausencia/Presencia Burkholderia cepacia, Ausencia/Presencia de Coliformes totales. Escherichia coli, Ausencia/Presencia de Candida albicans. Se trabajó con el kit comercial COSMETIKIT de la casa comercial Microkit, el cual se basa en la Norma UNE-EN-ISO 16140:2003; el mismo que nos brindó el material adecuado para la realización de los análisis.
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Evaluación microbiológica de la presencia de hongos en ambientes de la Escuela de Bioanálisis de la Pontificia Universidad Católica del Ecuador mediante la aspiración de volumen de aire en tiempo definido como una de las causas del Síndrome del Edificio Enfermo durante el 2011.
(PUCE - Quito, 2012) Rivadeneira Calvache, Daniela Alexandra; Granda Moreno, Elena Isabel
La presencia de esporas y estructuras fúngicas, diseminadas en el aire de ambientes internos pueden ser inhaladas en varias concentraciones, constituyendo una fuente de contaminación, que puede provocar alergias, asma, rinitis, bronquitis crónica, hasta alteraciones físicas y mentales como estrés e incomodidad que influyen en el rendimiento laboral. La Escuela de Bioanálisis, funciona en dos edificios: Edificio de Ciencias Exactas y Naturales y Edificio de Microbiología, en los que se encuentran distribuidos: oficinas, aulas, baños, auditorios y laboratorios. Estos espacios han perdido modernidad y a ello se suman factores como humedad, falta de ventilación, temperatura inadecuada, iluminación deficiente que posibilitan la presencia de hongos y el desarrollo del Síndrome del Edificio Enfermo. La metodología aplicada para el muestreo de aire fue la de captación por impacto activo y con la cual se obtuvieron 59 muestras de los 31 lugares analizados. Se identificaron 22 géneros de hongos mediante el cultivo en el laboratorio, siendo el Cladosporium spp., con un 90,32% el género más contaminante, seguido de Penicillium spp., con un 64,52%, luego el Rhizopus spp., y el Helminthosporium spp., con un 32,3% respectivamente, en los ambientes analizados de los dos edificios. Para el cultivo de los hongos se utilizo dos medios, el Agar Papa Dextrosa y el Agar Rosa de Bengala, resultando este último más selectivo y de gran utilidad en el recuento e identificación de estos microorganismos.
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Verificacion del proceso de limpieza y desinfección de superficies en cafeterías mediante métodos microbiológicos y de Bioluminiscencia de ATP
(PUCE - Quito, 2012) Lara Galarza, Pedro Sebastián; Granda Moreno, Elena Isabel
El presente estudio se realizó con la finalidad de verificar el procedimiento de limpieza y desinfección de las superficies en contacto con los alimentos de las cafeterías de un centro universitario de la ciudad de Quito administrado por la Empresa de Servicios Hoteleros y de Alimentos y Bebidas “XSERSA”. Se efectuó el muestreo de 200 superficies en 2 cafeterías antes y después del proceso de limpieza y desinfección, mediante la técnica de bioluminiscencia de ATP con equipos de la compañía 3M: luminómetro portátil UNI-LITE NG y los hisopos CLEAN TRACE. Las superficies muestreadas se distribuyeron de la siguiente manera: 50 del área de despacho de almuerzos de la cafetería 1, 50 del área de preparación de ensaladas frías de la cafetería 1, 50 del área de despacho de desayunos y almuerzos de la cafetería 2 y 50 del área de preparación de sanduches de la cafetería 2. De las superficies que se encontraron fuera del parámetro aceptable de la técnica de bioluminiscencia (≤ 300 URL), se realizó la siembra en procura de mesófilos aerobios con el objetivo de comprobar si esas superficies presentaban contaminación con microorganismos, con materia orgánica o ambos. Analizando los resultados se encontró que el 80% de las superficies no fueron aptas para producir o despachar alimentos porque estuvieron fuera de los parámetros aceptables y por consiguiente contaminados, y solo el 20% fueron aptas para preparar o despachar alimentos. Del total de superficies contaminadas o sucias el 26% correspondió a contaminación por mesófilos aerobios y el 74% fue por causa de materia orgánica. Finalmente, se procedió a realizar una capacitación a todo el personal de la empresa sobre la limpieza y desinfección y la importancia de establecer procedimientos operativos estandarizados de saneamiento (POES) para la implementación a futuro de un sistema de aseguramiento de la calidad.
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Prevalencia de Staphylococcus Aureus en manipuladores de alimentos en el área de producción (cocina caliente y fría, pastelería, carnes), de una empresa privada, Tumbaco – 2012.
(PUCE - Quito, 2012) García Cárdenas, Jéssica Nathali; Egas Benavides, Juan Elías
Los manipuladores de alimentos constituyen un potencial foco de contaminación, transmisión e infección de enfermedades transmitidas por alimentos. El monitoreo microbiológico para determinar la prevalencia de Staphylococcus aureus en los manipuladores de alimentos constituye una de las estrategias de vigilancia enfocadas en la mejora continua de una empresa. Los objetivos de esta investigación son: verificar el correcto uso de la vestimenta laboral, determinar la presencia del patógeno mediante análisis microbiológicos y ayudar con recomendaciones a partir de los resultados para establecer correcciones y/o se implanten mejoras para prevenir una posible contaminación para así garantizar los productos y afianzar la confianza de los clientes. Se tomaron tres muestras por manipulador de alimentos: hisopado nasal, hisopado oral e impronta de las dos manos. A partir de estas muestras se realizaron los análisis microbiológicos correspondientes. El presente estudio establece una prevalencia del 50% de Staphylococcus aureus en los manipuladores de alimentos del área de producción (cocina fría, caliente, carnes y pastelería) por lo que es necesario un mayor control en los procedimientos de higiene personal, lavado y desinfección de manos y control médico para prevenir cualquier posible infección. La legislación nacional no incluye análisis específicos para Staphylococcus aureus, siendo este un patógeno muy conocido como agente productor de enfermedades transmitidas por alimentos (ETA), pero a nivel internacional sí se lo valora y se exigen controles periódicos, por lo tanto la empresa por su alto nivel de competitividad y visión decidió aceptar este estudio con la finalidad de verificar su control interno del personal y según los resultados, posiblemente incluir este parámetro para prestar un mejor servicio y garantizar su producto.
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Evaluación del efecto antimicótico de bacterias aisladas de la piel de sapos Hyloxalus de la torreae, Hyloscirtus larinopygion, Pristimantis Pyrrhomerus y Pristimantis sp. de la localidad de Morán (Provincia del Carchi) frente al hongo patógeno Batrachochytrium dendrobatidis.
(PUCE - Quito, 2014) Garzón Larrea, Milena Jazmím; Palacios Bonifaz, Pablo Santiago
En el Ecuador casi una de cada tres especies de anfibios está amenazada con extinción, esto corresponde a 148 especies equivalente a 31,3%. Los declines de anfibios neotropicales se sugieren por efectos sinérgicos entre varios factores al cambio climático, pérdida de hábitat y quitridiomicosis. La quitridiomicosis es una enfermedad infecciosa asociada a los declines de anfibios a nivel mundial que es causada por el hongo Batrachochytrium dendrobatidis. El patógeno afecta directamente la piel del anuro la cual regula el funcionamiento del intercambio de gases respiratorios y agua, provocando un desequilibrio osmótico y la reducción en las concentraciones de electrolitos plasmáticos que llevan al deterioro del funcionamiento eléctrico y la muerte. Por otro lado se conoce que las bacterias presentes como simbiontes en la piel son las que ayudan a la persistencia de algunas poblaciones de anfibios frente a esta infección. El presente estudio es descriptivo y tiene como objetivo evaluar el efecto antimicótico de las bacterias aisladas de la piel de anuros frente al hongo patógeno. Para cumplir con este objetivo se analizaron 12 anuros de cuatro especies distintas de las cuales se aislaron bacterias de la piel que fueron probadas en los respectivos ensayos de antagonismo para su posterior identificación molecular. En este estudio se logró aislar un total de 147 morfotipos bacterianos de la piel de cuatro especies de anuros de los cuales 67 morfotipos presentan inhibición, además el mayor número de morfotipos bacterianos con inhibición que se identificaron pertenecen al género Pseudomonas de las especies de anfibios analizados, Pristimantis pyrrhomerus una especie amenazada que tiene la mayor inhibición frente al patógeno. Concluyendo que existen bacterias en la piel de los anfibios analizados que inhiben in vitro el crecimiento de Batrachochytrium dendrobatidis.
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Diversidad de hongos endófilos relacionados con lesiones necróticas en fréjol común (Phaseolus vulgaris L.) en la provincia de Loja, Ecuador, 2013
(PUCE - Quito, 2014) Cornejo Espinoza, Francisco Javier; Yánez Altuna, Jeniffer Marcela
La diversidad de hongos endófitos en lesiones necróticas de fréjol (Phaseolus vulgaris L.) cultivado en diversos cantones de la provincia de Loja fue evaluada. Cien muestras fueron procesadas en los laboratorios de la Escuela de Bioanálisis de la Pontificia Universidad Católica del Ecuador (PUCE). Un total de sesenta hongos fueron aislados e identificados, los cuales fueron obtenidos de tejidos de hojas, vainas y tallos. La identificación molecular de estos microorganismos se realizó mediante secuenciación de la región ITS (Espaciadores Internos Transcritos) de los genes ribosomales. Las secuencias fueron comparadas con aquellas disponibles en el Banco de Genes del NCBI mediante la herramienta BLAST, obteniendo así porcentajes de similitud entre el 98% y 100%. Como resultado se encontró veinte y ocho especies distintas, las cuales fueron tomadas como nuestras unidades operacionales taxonómicas (OTUs). Los índices ecológicos de Shannon y Simpson fueron utilizados en este estudio para determinar la diversidad de hongos endófitos en el fréjol común. En general, la diversidad de los hongos endófitos fue elevada (1,28) y las especies dominantes fueron Epicoccum nigrum, Boeremia telephii, Fusarium sp. y Alternaria tenuissima, conocidos todos como endófitos típicos y productores de atractivos metabolitos de gran beneficio para la planta y con interés biotecnológico. La construcción del árbol filogenético utilizando el método de Neighbor-Joining arrojó ocho agrupamientos, de los cuales seis pertenecieron al filo Ascomycota, uno a Basidiomycota y el octavo fue el grupo externo.
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Aislamiento y evaluación de la viabilidad de cianobacterias de la Rizósfera de plantas leguminosas cultivadas en la parroquia Poaló, Latacunga – Cotopaxi.
(PUCE - Quito, 2014) Martínez Pérez, Raquel Estefanía; Morales Avendaño, Ever Darío
En el Ecuador, los recursos agrícolas representan una parte importante del potencial económico, de ahí que el uso de biofertilizantes representan una alternativa para la sustitución de fertilizantes químicos pues estos proporcionan mayor rentabilidad económica, aumentan la productividad de los cultivos, reducen los efectos de la fertilización química sobre el medio ambiente y la salud. Es por eso que en el presente trabajo se reporta la evaluación de consorcios con cianobacterias aisladas de suelos agrícolas para determinar su viabilidad y su potencial biofertilizante. Las cianobacterias se aisladaron en medio sólido BG11o, de muestras tomadas de leguminosas completas con su raíz y rizósfera, cultivadas en la Parroquia Poaló ubicada al noroeste de la ciudad de Latacunga, Provincia de Cotopaxi. Las cianobacterias fijadoras de nitrógeno aisladas fueron Nostoc sp., Anabaena sp. y Calothrix sp. De la fase de escalamiento de los consorcios con estas cianobacterias se obtuvo un volumen final de 45 L, a partir del cual se cosechó la biomasa, producto de la sedimentación del cultivo, en un volumen de 1.125 L. Previa a la inoculación de los diferentes tratamientos se realizó un análisis físico-químico del suelo en donde se obtuvo que el porcentaje de materia orgánica era de 1.93%, nitrógeno 0.10%, fósforo 49.6 ppm, y azufre 13.08 ppm. Posteriormente se inocularon 12 bandejas con 2 kg de suelo cada una, procedente del mismo lugar de donde fueron aisladas las cianobacterias, cada una con cuatro tratamientos: testigo (400 mL de agua destilada), fertilizante químico (400 mL), consorcio de cianobaterias (250 mL de consorcio + 150mL de agua destilada) y fertilizante químico + consorcio de cianobacterias (125 mL de consorcio +75 mL de agua destilada). Los resultados de las evaluaciones de nutrientes de los diferentes tratamientos evidenciaron que la combinación de consorcio de cianobacterias y fertilizante químico brindó el contenido más alto de materia orgánica, N y S con 4.5%, 0.23% y 109.8 ppm respectivamente. El segundo contenido más alto de materia orgánica, N y S se reportó en el tratamiento con el consorcio de cianobacterias con 2.2 %, 0.11% y 90.2 ppm respectivamente. Se establece un protocolo para la producción y mantenimiento de consorcios con cianobacterias fijadoras de nitrógeno, medio de cultivo y condiciones de escalado de los cultivos discontinuos. La conformación de consorcios cianobacterias- microalgas en biotecnología agrícola permite ampliar el espectro de microorganismos utilizados en biofertilización de suelos.
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Identificación morfológica y molecular de hongos microscópicos obtenidos en cultivos comerciales enfermos, en la región interandina centro- norte del Ecuador en el período 2011-2012
(PUCE - Quito, 2014) Avilés Guzmán, María Cristina; Granja Valle, Gabriela Fernanda; Yánez Altuna, Jeniffer Marcela
Ecuador es uno de los países con mayor biodiversidad de hongos microscópicos en el mundo debido a su variedad de climas y regiones. Por esa razón existe una gran diversidad de hongos altamente adaptables que se encuentran presentes en prácticamente todos los ecosistemas. Si bien en su mayoría cumplen con una función indispensable y benéfica, existen algunas especies que, desde el punto de vista humano, son dañinas dado que son los organismos que más afectan a los cultivos de importancia comercial. El estudio de hongos microscópicos mediante técnicas moleculares se ha convertido en una herramienta útil para el reconocimiento rápido y preciso de los posibles patógenos que afectan a los cultivos. El objetivo del presente estudio fue identificar tanto morfológica como molecularmente las especies de hongos microscópicos presentes en la superficie de plantas aparentemente enfermas. Para lo cual, se colectaron 46 muestras de las partes aéreas de cuatro cultivos de importancia económica que estaban aparentemente enfermos. El aislamiento, purificación e identificación morfológica de los hongos se realizó en los laboratorios del Centro Internacional de la Papa (CIP-Quito); mientras que la extracción de ADN y amplificación del gen ITS se realizaron en los laboratorios de la Escuela de Bioanálisis de la Pontificia Universidad Católica del Ecuador. Los productos de PCR obtenidos se enviaron para su purificación y secuenciación a Macrogen, Seúl - Corea. Las secuencias fueron editadas para obtener secuencias consenso las mismas que fueron comparadas con las secuencias disponibles en la base de datos GenBank para su identificación molecular utilizando la herramienta BLAST. La biodiversidad fue calculada utilizando los Índices de Shannon y Simpson, y el análisis filogenético se realizó con el método Neighbour joining. Como resultado, un total de 38 hongos fueron aislados de los cuales 9 fueron identificados morfológicamente y 34 molecularmente. Las especies de hongos microscópicos identificados pertenecen a los géneros Alternaria, Bionectria, Clonosthachys, Epicoccum, Fusarium, Botriotinia y Paecilomyces. En conclusión, la mayoría de los hongos identificados son endófitos los mismos que pueden ser utilizados como antagonistas contra otros patógenos; por tanto pueden ser utilizados como biocontroladores de plagas que afectan a los principales cultivos de interés comercial y fomentar una agricultura ecológica.
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Diseño de una guía para el manejo y manipulación de alimentos por parte de los proveedores escolares en las Unidades Educativas del Milenio, región Sierra-Ecuador, 2015
(PUCE - Quito, 2015) Paz Viera, David Fabián; García Paredes, Yolanda Cecilia
El Instituto de Provisión de Alimentos, PROALIMENTOS, es una institución creada con el objeto de proveer alimentos para las instituciones públicas que por su carácter de servicio social así lo requieran, este objetivo debe desarrollarse por política estatal, en un ámbito de “Economía Popular y Solidaria”, donde los actores que presten el servicio o sean contratados por Proalimentos deben pertenecer a sectores con un nivel de vulnerabilidad económica alto, enfocándose a la política gubernamental de generar oportunidades para los sectores históricamente olvidados de la sociedad. En este sentido, Proalimentos ha tomado a su cargo como plan piloto, la provisión de almuerzos escolares para los beneficiarios que pertenecen al Ministerio de Educación, correspondientes a Unidades Educativas del Milenio y Colegios réplica de la Sierra del Ecuador; debido a las condiciones citadas como características obligatorias de los proveedores del servicio, se ha generado la necesidad de vincularlos en proyectos de capacitación permanente con el objetivo de generar un régimen de calidad constante en los productos y servicios que se entregan a los usuarios. En base al requerimiento mencionado se crea la necesidad de elaborar un documento técnico que mencione y proponga directrices y consejos relacionados a gestionar la calidad de los procesos que se llevan a cabo durante la preparación de alimentos para las Instituciones Educativas. Se toman en cuenta algunos reglamentos vigentes a nivel nacional, además del análisis de estadísticas relacionadas con las consecuencias que trae la mala manipulación de alimentos a nivel País, para proponer los temas entorno a los cuales se elabora el manual, además se propone un sistema de monitorización permanente del servicio de preparación y entrega de alimentos. Por último se determina una malla curricular como propuesta para capacitar formalmente a los proveedores del servicio de preparación y entrega de alimentos, con el objetivo de cerrar el círculo académico y aumentar considerablemente los niveles de calidad del servicio que los usuarios reciben en las instituciones educativas.
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Evaluación de la actividad bactericida del agua de plata sobre ensaladas listas para el consumo en cafeterías de una institución de educación superior
(PUCE - Quito, 2015) Bonifaz Panamá, David Alejandro; Granda Moreno, Elena Isabel
El presente estudio se realizó con el objetivo de determinar la mejor concentración del agua de plata y el tiempo de contacto para inhibir el crecimiento bacteriano en ensaladas listas para el consumo de las cafeterías de una institución de educación superior. Se realizó el muestreo de la totalidad de las ensaladas que son parte del menú de las cuatro cafeterías de la institución. Para su análisis se utilizaron placas Petrifilm para la detección de mesófilos aerobios, mohos y levaduras y E. coli/coliformes; se manejó la primera dilución de la muestra para la siembra y se enfrentó en volúmenes iguales con las concentraciones 4 ppm y 10 ppm del agua de plata; al primer minuto de contacto se realizó la primera siembra en las placas de los tres microorganismos indicados y luego de transcurridos 5 minutos nuevamente se realizó otra siembra. Las placas fueron incubadas de acuerdo a sus requerimientos y transcurrido el tiempo de incubación se realizó el recuento de las mismas. Finalmente, se logró cumplir con los objetivos propuestos ya que desde el punto de vista microbiológico, el agua de plata disminuyó considerablemente la población bacteriana inicial de las ensaladas muestreadas hasta valores inferiores a m, lo que representa que son aceptables para el consumo humano según el Real Decreto 3484/2000 BOE 12/1/2001 para comidas preparadas sin tratamiento térmico y comidas preparadas con tratamiento térmico, que lleven ingredientes no sometidos a tratamiento térmico. La mayor concentración y el mayor tiempo de contacto fueron los factores eficaces para la disminución de la carga microbiana inicial a excepción de los mohos, donde se evidenció que por su diferente estructura a la de las bacterias no presentó una disminución considerable.