Bioquímica Clínica
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Browsing Bioquímica Clínica by Author "*Escalante Vanoni, Luis Santiago"
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Item Open Access Detección de los genes vacA y cagA en cepas de helicobacter pylori obtenidas de un hospital de la ciudad de Quito y su asociación con el grado de lesión gástrica(PUCE, 2017) Núñez Acurio, Daniela Katherine; *Escalante Vanoni, Luis SantiagoHelicobacter pylori es una bacteria involucrada en enfermedades gastrointestinales, principalmente en el desarrollo de gastritis y en el proceso secuencial del cáncer gástrico. El grado de afección que puede causar este microorganismo depende de los factores de virulencia que expresa y las variaciones génicas de los mismos. Entre los genes de virulencia que se han relacionado con mayor riesgo de enfermedad gástrica se encuentran las citotoxinas CagA y VacA. Bajo este contexto, el presente estudio buscó determinar la presencia de estos genes que codifican estas citotoxinas y establecer su relación con la expresión de patologías gástricas. Materiales y Métodos: La muestra estuvo conformada por 231 pacientes que se realizaron endoscopía digestiva alta, en estos se identificó la presencia de Helicobacter pylori a través del cultivo y la amplificación de genes específicos (ureA, flaA2, cagA, vacA); mediante secuenciación se determinó los genotipos cagA y vacA para su posterior relación de la expresión de estos genes con el grado de lesión de las enfermedades. Resultados: La prevalencia de Helicobacter pylori fue del 53.24% determinado por la técnica de PCR. Por otro lado, se estableció una proporción del 50.4% del gen cagA, y del 57.7 % del gen vacA; con una mayor frecuencia de los alelos s1/m1 que se presentan en el 81.7% de los casos positivos para el gen vacA. En el resultado de secuenciación no se determinó mutaciones significativas de los genes cagA y vacA. Realizando la prueba estadística de Chi cuadrado se estableció que no existe relación significativa entre la expresión de los genes y el grado de lesión gástrica. Conclusiones: La infección por Helicobacter pylori se detectó en un 53.24% de los casos a través de la técnica molecular de PCR; siendo mayor en el género masculino y en el rango de edad de 53-69 años. Las cepas presentaron los genes cagA y vacA, sin presentar mutaciones reportadas anteriormente; además no se demostró relación entre las patologías encontradas, el grado de lesión y la presencia de los genes.Item Open Access “Determinación de la eficacia de Ceftazidime/Avibactam por el método de microdilución en caldo en cepas de enterobacterias y de Pseudomonas aeruginosa recibidas en el INSPI, año 2017”(PUCE-Quito, 2018) Moncayo Cabascango, Pamela Monserrate; *Escalante Vanoni, Luis SantiagoLas enterobacterias y Pseudomonas aeruginosa son patógenos comúnmente relacionados con infecciones asociadas a la atención en salud, y de mayor relevancia clínica debido a la resistencia que presentan a los antibióticos. A nivel mundial, la resistencia antimicrobiana es considerada como un problema de salud pública, y como consecuencia de esta, surge Ceftazidime/avibactam (CAZ/AVI), una combinación de cefalosporina de amplio espectro más un inhibidor de betalactamasas. Este antimicrobiano inhibe betalactamasas de clases A, C, y muy pocas D. Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue analizar la actividad in vitro de ceftazidime/avibactam a través de la metodología de microdilución en caldo en cepas de enterobacterias y Pseudomonas aeruginosa recibidas en el INSPI, año 2017. MATERIALES Y MÉTODOS: La muestra estuvo conformada por 68 cepas de enterobacterias y 24 cepas de Pseudomonas aeruginosa pertenecientes al Centro de Referencia Nacional de Resistencia Antimicrobiana. La metodología empleada fue la microdilución en caldo, método Gold Standard. La microdilución de ceftazidime/avibactam se realizó en combinación con diluciones seriadas dobladas de ceftazidime (4 a 32 μg/ml). Los métodos mCIM y eCIM detectaron y diferenciaron carbapenemasas. El perfil de susceptibilidad se obtuvo por el sistema automatizado Vitek 2 Compact y la caracterización molecular de genes por PCR, datos que fueron proporcionados por CRN-RAM. RESULTADOS: CAZ/AVI actuó de manera efectiva en 83/92 cepas, pero en las 9/92 cepas se mantuvieron resistentes debido a sus fenotipos de resistencia NDM, VIM e IMP. Con el método de mCIM se obtuvo un 53% de cepas sin carbapenemasas y un 47% con carbapenemasas, de las cuales por medio de eCIM se logró diferenciar serin carbapenemasas con 37% y metalobetalactamasas con el 10%. CONCLUSIONES: CAZ/AVI demostró una potente actividad in vitro en aislamientos clínicos de enterobacterias y Pseudomonas aeruginosa y devolvió la sensibilidad a CAZ en un 90,21%.Item Open Access Determinación del perfil epidemiológico del adulto mayor que acude a la Corporación de Salud del barrio Atucucho Quito periodo 2015-2018(PUCE - Quito, 2019-09-15) Guamán Collantes, Angélica María; Suquillo Simbaña, Dayana Lizbeth; *Escalante Vanoni, Luis Santiago; Escalante Vanoni, Luis SantiagoIntroducción: Atucucho es un barrio urbano marginal localizado al noroccidente de la ciudad de Quito, la estructura demográfica demuestra que tiene un porcentaje elevado de adultos mayores, para el presente estudio se revisó las historias clínicas de 631 pacientes, que por su propia condición necesita de cuidados especiales de salud. En el barrio nunca se ha realizado una investigación que mida el perfil epidemiológico de este grupo poblacional que permita a los directivos del establecimiento de salud realizar una programación que se adecúe a la realidad del barrio. En consecuencia, la determinación del perfil epidemiológico del adulto mayor que acude a la Corporación de Salud del Barrio Atucucho se constituye en una herramienta de capital importancia al servir de indicador de patologías relacionadas con la edad, permitiendo mejorar los servicios que se les brinda a este grupo etario y disminuir los gastos económicos por servicios sanitarios y de atención social brindados. Instituir las necesidades y demandas de esta población a la vez que permite planear o proponer la infraestructura de los servicios de salud, por tanto, la determinación del perfil epidemiológico constituye el punto de partida para la planificación, ejecución y evaluación de los programas de salud. Objetivo: Describir el perfil epidemiológico de los adultos mayores que acudieron a la Corporación de Salud del Barrio Atucucho de la ciudad de Quito durante el periodo 2015- 2018. Materiales y métodos: Investigación de enfoque cuantitativo, descriptivo, transversal y retrospectivo mediante la revisión de las historias clínicas de los adultos mayores de 60 años que acuden a la Corporación de Salud del Barrio Atucucho durante el período 2015 - 2018. Los datos recolectados fueron tabulados, según las variables de estudio en una tabla Excel y posteriormente ingresados en el paquete estadístico SPSS v 22.0 para su posterior análisis. Se establecieron conclusiones y recomendaciones. Resultados: El estudio evidencia un predominio del sexo femenino (62.76%); del grupo etario 60-70 años (60.61%); el estado civil casado (70.37%); del sobrepeso (40.8%) y la existencia de bajo ingreso por lo que están sustentados económicamente por el bono de desarrollo humano (48.56%). La hipertensión arterial (31.4%); otras enfermedades cardiovasculares (26.1%); la diabetes (12.8%) y las EPOC (6.3%) son las patologías más frecuentes en el 76.7% de los pacientes. La referencia a establecimientos de mayor complejidad se concentra en atenciones oftalmológicas 11%; 10.8% urológicas; y el 10% cardiovasculares, sin embargo, solo el 16.66% de los pacientes derivados portadores de enfermedades crónicas regresaron a la Corporación de Salud del Barrio Atucucho. Conclusiones: Se obtuvo que los adultos mayores se caracterizan por presentar sobrepeso, y enfermedades crónicas con un bajo nivel de control en los centros médicos; el 10.8% de la población tiene un seguimiento por enfermedades crónicas y el 10.45% es derivado a la atención secundaria; de tal forma, se evidencia la necesidad de fomentar el Manual del Modelo de Atención Integral de Salud- MAIS promulgado por el Ministerio de Salud Pública, sobre todo para aquellas personas con bajos recursos económicos. Los adultos mayores de 60 años del barrio Atucucho se encuentran expuestos a riegos que deterioran su salud y por ende tienen una baja calidad de vida.Item Open Access Estandarización de una reacción en cadena de la polimerasa multiplex para la identificación de siete especies de importancia clínica de Candida(PUCE-Quito, 2019-03-15) Rosales Ríos, Christian Alejandro; *Escalante Vanoni, Luis SantiagoIntroducción: la identificación de las especies de Candida ha ido evolucionando con el pasar del tiempo. El cultivo micológico es el primer paso para obtener las colonias aisladas, se lo realiza en agar Sabouraud; la prueba más utilizada es el tubo germinal, técnica que permite diferenciar las especies de Candida albicans de las no albicans, es un método rápido para observar el desarrollo de hifas; dicha metodología agrupa a todas las especies diferentes a Candida albicans en el grupo de no albicans lo que deja una gran vacío de información acerca de la determinación de la especie de esta levadura. Actualmente, las técnicas se han adaptado a las necesidades de los laboratorios por lo que se han desarrollado pruebas bioquímicas como el auxonograma y zimograma, así como agares cromogénicos que diferencian a las especies de Candida por colores. Por lo que, el objetivo de este estudio es desarrollar y estandarizar una técnica de reacción en cadena de la polimerasa multiplex para la identificación de siete especies de importancia clínica de Candida. Metodología: en el presente estudio se emplearon cepas estandarizadas de siete diferentes especies de Candida albicans, auris, glabrata, guilliermondii krusei, parapsilosis y tropicalis; las cuales fueron cultivadas y su ADN obtenido mediante extracción por columna. Se realizó gradientes de temperatura y concentración de primers para la estandarización de la PCR multiplex que amplificó el gen ITS 1 para las especies albicans, glabrata, guilliermondii, krusei y tropicalis, el gen TopoIsomerasa II de la especie auris y la región 5.8s ADN de la especie parapsilosis. Se realizaron diluciones de ADN para determinar el límite de detección y se comparó la especificidad de primers mediante pruebas con varios ADN de diferentes especies de levaduras.Item Open Access Lectura interpretativa del antibiograma en enterobacterales basada en los criterios de organismos internacionales para la determinación de mecanismos de resistencia antimicrobiana a nivel de laboratorios de microbiología clínica de mediana y alta complejidad(PUCE - Quito, 2021-05-21) Chávez Tamayo, Joan Fernando; Gainza Ubillus, María Gabriela; *Escalante Vanoni, Luis SantiagoEl orden “Enterobacterales” es el grupo de bacilos Gram negativos de mayor importancia clínica debido a su capacidad de producir infecciones en población inmunocompetente e inmunocomprometida. La resistencia antibiótica de este orden se ha convertido en una problemática de salud pública a nivel mundial ya que son capaces de adquirir y transmitir resistencia a múltiples antimicrobianos. En la actualidad el método más utilizado para la detección de fenotipos de resistencia es Kirby Bauer debido a su bajo costo y sencillez. Sin embargo, la inadecuada lectura interpretada del antibiograma conlleva fallas en la identificación de fenotipos de resistencia siendo este el problema central de esta investigación. Por lo tanto, este proyecto se enfoca en crear una herramienta teórica e ilustrativa enfocada en la determinación, lectura e interpretación de los mecanismos de resistencia en enterobacterales que sirve como base para la lectura interpretada del antibiograma. Metodología: El proyecto se realizó en cuatro componentes. El primer componente se centró en la búsqueda bibliográfica de las características generales de los enterobacterales, mecanismos de resistencia intrínsecos y adquiridos en enterobacterales y la epidemiologia a nivel mundial, regional y local. En el segundo componente se incluyeron las directrices para la lectura interpretada del antibiograma que comprende la selección y disposición de discos antibióticos, así como, la identificación fenotípica de mecanismos de resistencia. El tercer componente comprende el diseño de la representación gráfica de la disposición de discos en enterobacterales y fenotipos de resistencia. Por último, el cuarto componente tuvo como objetivo el diseño gráfico final del capítulo. Resultados: Se redactó el capítulo “Lectura interpretativa del antibiograma en Enterobacterales” que formará parte del libro para la lectura interpretativa del antibiograma. De igual manera, se diseñaron las representaciones gráficas respecto a la disposición de discos y fenotipos de resistencia observados en el antibiograma. Conclusiones: La guía para la lectura interpretada del antibiograma es una herramienta indispensable en el laboratorio de microbiología ya que aporta valor clínico al reporte de resultados debido a que ayuda a identificar resistencia intrínsecas y adquiridas que pueden desembocar en fracasos terapéuticos si no son identificadas adecuadamente. De igual manera contribuye como herramienta epidemiológica generando información de cepas resistentes circulantes en el ámbito comunitario y hospitalario, también, es una herramienta de control de calidad ya que proporciona una guía para la inferencia de mecanismos de resistencia.Item Restricted Motivos EPIYA en material genético de Helicobacter pylori obtenido de aislamientos clínicos en el Hospital de Especialidades de las FF. AA. n°1 de la ciudad de Quito en el periodo 2016 -2017 y su asociación con el grado de lesión gástrica(PUCE-Quito, 2019-06-28) Navarrete Mesías, César Alejandro; *Escalante Vanoni, Luis SantiagoAntecedentes: Helicobacter pylori es el principal microrganismo causante de enfermedades gastrointestinales, como gastritis crónica, úlcera péptica, linfoma MALT entre otras. La presencia de genotipo s1/m1 del gen vacA y los motivos de fosforilación EPIYA del gen cagA se han relacionado con la producción de inflamación gástrica prolongada. El presente estudio determina la presencia de estos genotipos de virulencia y su relación con gastritis atrófica. Métodos: Se incluyeron 231 pacientes con antecedentes de dispepsia sometidos a endoscopia gastrointestinal superior, recuperando muestras de tejido gástrico para mediante técnicas moleculares establecer la presencia de H. pylori amplificando los genes housekeeping ureA y flaA2; adicionalmente se amplificó los alelos de señal (s) y la región media (m) presentes en el gen vacA, y mediante secuenciación los patrones de repeticiones de los motivos de fosforilación de tirosina dentro de los motivos Glu-ProIle-Tyr-Ala (EPIYA) del gen cagA. Se realizó un chi-cuadrado para establecer relación entre los genes de virulencia y los grados de lesión gástrica. Resultados: Un total de (91/231) muestras fueron positivas para H. pylori, de las cuales (57/91) amplificaron el gen cagA y (66/91) el gen vacA. El 81,8% (54/66) de las muestras positivas para el gen vacA presentaron la combinación de alelos s1/m1 asociado en su mayor parte con gastritis atrófica (GA). Los motivos EPIYA más frecuentes fueron ABC y ABCC en 54,4% (31/57) y 40,4% (23/57) respectivamente. Se observó una relación de los genes con GA y sus grados de lesión con un valor p>0.05. El patrón cagA+/vacA s1/m1+/EPIYA ABC se encuentra en la mayoría de las muestras. Se encontró una relación p=0.02 entre la presencia de los genes vacA y cagA Conclusiones: Los resultados indican mayor proporción de atrofia gástrica en pacientes infectados con H. pylori. La suma de los factores de patogenicidad como el genotipo cagA+/vacA s1/m1+/EPIYA ABCC aumenta el potencial de virulencia del microrganismo sugiriendo que la coexistencia de estos genes podría resultar en un incremento de la severidad de la progresión de la inflamación que conduce a lesiones precancerosas.Item Open Access Panorama epidemiológico actual de la resistencia antimicrobiana y perspectivas para el futuro(PUCE- Quito, 2022-05-18) Granizo Vásconez, Karen; *Escalante Vanoni, Luis Santiagola resistencia antimicrobiana es considerada por la Organización Mundial de la Salud un problema de salud pública a nivel mundial. El incremento acelerado de la resistencia a los antibióticos pone en peligro la capacidad de tratar enfermedades infecciosas comunes, y es causa del aumento de la morbi-mortalidad y los costos elevados de estancias hospitalarias. En América Latina el aumento de resistencias antimicrobianas provoca un escenario epidemiológico poco favorable y se requiere de información epidemiológica oportuna para el control del problema y la toma de decisiones gubernamentales. Metodología: desarollo del capítulo “Panorama Epidemiológico Actual de la Resistencia Antimicrobiana y Perspectivas para el Futuro”, que incluyó información mundial, regional y local de las resistencias antimicrobianas. La escritura del capítulo estuvo basada en 3 componentes que comprenden la armonización de artículos, la recopilación de información y el diseño del formato del capítulo. La revisión bibliográfica se realizó en bases de datos como Pubmed y Strobe en donde los artículos disponibles fueron escogidos bajo criterios de inclusión, además se tomó en cuenta la información epidemiológica publicada por las entidades de vigilancia de Ecuador y otros países de la región desde el año 2014 hasta la actualidad. Resultados: se diseñó el capítulo “Panorama Epidemiológico de la Resistencia Antimicrobiana y Perspectivas para el Futuro” que formará parte de la guía para la lectura interpretativa del antibiograma. Conclusiones: la información epidemiológica dentro de una guía de para la lectura interpretativa del antibiograma aporta con una visión general del comportamiento del problema lo cual estima el alcance y las posibles acciones futuras para mitigar los efectos del mismo. Además de ser una herramienta de estudio, se debe considerar que mediante información epidemiológica oportuna se puede evaluar, diseñar y ejecutar programas de control y vigilancia para disminuir la diseminación de resistencias.Item Open Access Revisión bibliográfica narrativa: epidemiología molecular de la resistencia antimicrobiana global de Klebsiella pneumoniae productora del gen blaOXA-48(PUCE- Quito, 2022-04-26) Imbaquingo Guerra, Galo Paúl; *Escalante Vanoni, Luis SantiagoEl aumento de reportes de aislamientos de Klebsiella pneumoniae productora del gen bla OXA-48 en la última década es un problema a nivel global. Este tipo de cepas presentan mayor resistencia a carbapenémicos. En consecuencia, disminuyen las opciones terapéuticas ante infecciones causadas por este microorganismo. Por lo tanto, el objetivo de esta revisión bibliográfica es describir la diferente clonalidad, plásmidos portadores, susceptibilidad antimicrobiana y establecer relaciones epidemiológicas entre regiones para definir el panorama de la aparición y circulación de este tipo de carbapenemasas. Metodología: La revisión bibliográfica narrativa se llevó a cabo en bases de datos indexadas en la hemeroteca virtual de la PUCE con literatura científica publicada desde 1 enero de 2011 a 1 julio de 2021 de fuentes primarias, secundarias y terciarias. La recuperación y síntesis de la información siguió las recomendaciones propuestas por la declaración de PRISMA y la lista de verificación de STROBE. Resultados: Se incluyó 11 estudios que caracterizaron aislados de K. pneumoniae productora del gen bla OXA-48. El 52,64% de la información de los estudios provienen de países de Europa, mientras que un 46,48% de Asia y 0,88% de América. Se identificó un total de 54 secuencias tipo. Además, 10 diferentes plásmidos portaban este gen en los distintos aislados analizados en los estudios. Las cepas presentaban mayor coexpresión con el gen bla CTX-M-15 y multirresistencia antimicrobiana. Conclusiones: Existe un número escaso de publicaciones respecto a este tema en el continente americano. Los estudios incluidos provienen en su mayoría de países europeos. Los resultados obtenidos demuestran que la diversidad clonal de K. pneumoniae productora de OXA-48 incide en el aumento de la multirresistencia a nivel mundial.Item Open Access Revisión bibliográfica: carcinogénesis prostática por exposición a bisfenol a modelo experimental animal(PUCE - Quito, 2020-06-15) Viteri Obando, María Gabriela; Logacho Morales, Mónica Cristina; *Escalante Vanoni, Luis SantiagoEn el año 2018 más de 18 millones de personas fueron afectadas por el cáncer y de acuerdo con la Globocan esta cifra seguirá en aumento. En Ecuador se reportaron cerca de 28.000 casos nuevos de cáncer y de estos 3.322 afectaron la próstata. El cáncer de próstata se presenta debido al estilo de vida, edad, herencia o exposición laboral a sustancias tóxicas. Dentro de estas sustancias se encuentran los disruptores endócrinos que se encuentran en gran variedad como el Bisfenol A (BPA). El BPA es muy utilizado en la industria y principalmente en la fabricación de plásticos de policarbonato, los cuales son usados para almacenar alimentos y bebidas. El uso de BPA se encuentra regulado con un límite máximo de 0.05mg/Kg de alimento para evitar poner en peligro la salud de los consumidores ya que se conoce que la exposición a dicho disruptor podría generar cáncer de próstata. Estudios realizados en roedores explican los cambios histológicos y anormalidades genéticas que se presentan en las células prostáticas. Metodología: El presente estudio hizo una revisión bibliográfica en la cual se establecieron criterios de inclusión y exclusión que debían cumplir los artículos para ser seleccionados, se procedió con la búsqueda de información en varias bases de datos utilizando palabras claves y términos MeSH (títulos de temas médicos), la información se registró en el gestor bibliográfico Zotero, se procedió a realizar lectura del resumen y la respectiva eliminación de artículos que no cumplían con los criterios establecidos, continuando con lectura completa de cada uno de estos y para finalizar se realizó evaluación en pares. Resultados: Se seleccionaron 6 artículos, los cuales mencionan que la dosis más baja de BPA promueve cambios morfológicos en las células prostáticas, independientes de la vía de administración que haya sido utilizada. El BPA también cuenta con la capacidad de inducir la sobre expresión de genes, debido a un cambio de metilación del genoma en los tejidos prostáticos, el epigenoma de las células madre embrionarias se ve alterado por acción del BPA dando como resultado poblaciones neoplásicas. Conclusión: La exposición temprana a BPA presenta mayor riesgo a desarrollar cáncer de próstata debido a que ocasiona cambios epigenéticos, sin necesidad de alterar la secuencia de ADN. Una exposición a BPA a dosis bajas en recién nacidos o madres gestantes producen cambios de metilación de ADN, lo que ocasiona daños permanentes en el desarrollo y con el tiempo la aparición de enfermedades.