Bioanálisis clínico
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Browsing Bioanálisis clínico by Author "Escalante Vanoni, Luis Santiago"
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Item Open Access Comparación del coprocultivo vs la Técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) convencional para la detección de Salmonella Typhi en muestras fecales(PUCE, 2013) Espinoza Proaño, Daniela Alexandra; Iza Segovia, Estefanía Edith; Escalante Vanoni, Luis SantiagoExisten métodos tradicionales para identificar Salmonella Typhi que consisten en el empleo de medio de cultivo los cuales permiten la recuperación de dicho microorganismo, para luego realizar el aislamiento en medios selectivos, la identificación bioquímica y caracterización serológica, por lo que estos métodos pueden llegar a ser muy dispendiosos y de esta manera consumen mucho tiempo. Esta tesis busca comparar resultados obtenidos en el coprocultivo vs los resultados obtenidos en la PCR y la relación de sensibilidad y especificidad que presenta cada técnica para así poder dar a conocer cuál sería la más apropiada para poder llegar a un diagnóstico en un corto tiempo. Para la extracción del ADN se utilizó el kit comercial E.Z.N.A. Stool de la casa comercial OMEGA. Se realizó una PCR multiplex para la identificación de género mediante la amplificación de los siguientes genes: Grupo D (antígeno somático), fliC-d (antígeno flagelar) y wcdB (antígeno capsular) los cuales son propios de Salmonella Typhi. Para desarrollar este estudio se analizó un total de 144 muestras fecales, que fueron inoculadas artificialmente con cepas de S.Typhi conocidas y posteriormente fueron analizadas simultáneamente mediante técnicas de cultivo tradicionales y de biología molecular (PCR) para comparar datos y analizar la sensibilidad y especificidad de cada uno de los métodos. Del total de muestras se divide en tres grupos de 48, cada grupo es contaminado con concentraciones conocidas de S.Typhi de 300, 150 y 50 UFC lo cual permitirá seleccionar el inóculo más adecuado para el trabajo posterior. Con el estándar que se obtenga una mejor sensibilidad se procede a contaminar un total de 50 muestras, 25 de SalmonellaItem Open Access Determinación del número de tripletas CAG del gen IT15, en individuos con antecedentes familiares de la enfermedad de Huntington atendidos en diferentes unidades operativas de salud pública del Ecuador, en el año 2012(PUCE, 2014) Paredes Corrales, José Fabricio; Escalante Vanoni, Luis SantiagoIntroducción: La enfermedad de Huntington es una enfermedad neurodegenerativa y progresiva del Sistema Nervioso Central que produce principalmente 3 tipos de desórdenes: alteración en los movimientos, desórdenes cognitivos y desórdenes emocionales. La prevalencia de la enfermedad a nivel mundial es de 5-10 por cada 100.000 habitantes. La EH es un trastorno genético autosómico dominante producido por un aumento en el número de la tripleta CAG (glutamina) en el exón 1 del gen IT15 (HD), que codifica para una proteína citoplasmática llamada huntingtina. La huntingtina posee un segmento de poliglutaminas “poliQ” a partir del residuo 17, seguido de un segmento de repeticiones de prolina cerca del extremo N-terminal. El segmento de poli Q, puede contener de 9 a 36 repeticiones de CAG en personas que no poseen la enfermedad y mayor a 36 repeticiones en aquellos que manifiesta la enfermedad. Materiales y métodos: Se trabajó con 57 personas, correspondientes a 5 familias, en las cuales un ancestro de la familia fue diagnosticado con la patología. Se aisló ADN a partir de sangre total y se amplificó un fragmento del gen IT15 mediante el diseño de primers específicos. Los resultados se visualizaron en geles de agarosa al 3% y se analizaron en el software ImageJ. Resultados: Se pudo determinar que los pacientes C, E1, E, P, Q, K, Z, W, Y, X, H5, H8 tienen la EH, ya que poseen un alelo normal (menor a 36 repeticiones CAG), y un alelo expandido (mayor a 36 repeticiones CAG). De los 12 pacientes que presentaron la patología, uno padecía EH juvenil.Item Open Access Prevalencia de alergias a Dermatofagoides Farinae, Cynodon Dactylon y Alternaria Tenuis, en escolares de 5 a 12 años de la Escuela República de Bolivia de la ciudad de Quito, mediante detección de IGE específica(PUCE, 2015) Checa Nicolalde, Cristina Isabel; Escalante Vanoni, Luis SantiagoLas alergias son manifestaciones clínicas de frente a la exposición de un alérgeno; este tipo de manifestaciones desencadena un sin número de reacciones inflamatorias que van desde la susceptibilidad hasta la hipersensibilidad tipo I; sin embargo, de esto dependerá la predisposición genética de los individuos. En niños pre escolares los procesos alérgicos son confundidos con cuadros gripales de tipo viral, que transcurren por más de 15 días y repetitivos frecuentemente en el tiempo. La prevalencia de alergias a nivel mundial se reporta entre el 33 y el 70% en países como España y Chile que mantienen épocas estacionales definidas que son causales para la aparición de los alérgenos específicos. En Ecuador, los estudios de prevalencia para afecciones alérgicas son escasos, puesto que los tratamientos médicos siguen siendo enfocados a procesos de tipo viral. La prevalencia encontrada fue para Dermatofagoides farinae 28.7%; Cynodon dactylon (pasto bermuda y/o césped común) 3.6%; y Alternaria tenuis 1.0%; con un intervalo de confianza del 95 %; en relación a los factores de edad y género podemos destacar que el género masculino es más susceptible a la afección de alergias; hallazgo similar reportado en otros estudios sin que exista una explicación fisio - patológica que sustente el hallazgo epidemiológico, así también se determina que el grupo de niños menores a 8 años son más propensos a presentar alergias por el agente Dermatofagoides farinae. Evaluando otros factores de riesgo que pueden ser causantes de un aumento en la prevalencia a los agentes en estudio tenemos que: la herencia, presencia de mascotas y exposición al humo del cigarrillo son factores predominantes para aumentar la prevalencia, en especial en el agente Dermatofagoides farinae por cuanto forma parte del polvo de casa intra domiciliario de mayor exposición.