Tesis - Microbiología (Sin Restricción)
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Browsing Tesis - Microbiología (Sin Restricción) by Author "Astorga García, Diana"
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Item Open Access Aislamiento y reconstrucción de consorcios microbianos que permitan la optimización de la producción de biogás a partir de fangos residuales(PUCE-Quito, 2018) Sandoval Trávez, Andrés Mauricio; Astorga García, DianaLa necesidad de un manejo adecuado de desechos en el camal de la parroquia rural de Pacto y su posible utilización como fuente de energía renovable, que además detenga el deterioro ambiental, ha conducido a la búsqueda de tecnologías microbianas. De hecho, residuos como vísceras, sangre y heces son especialmente ricos en sustratos esenciales para la producción de biocombustible. Esta investigación se centró, por tanto, en aislar cepas metanogénicas cultivables, determinar consorcios intactos altamente activos y componer inóculos metanogénicos eficaces, a partir de fango residual acumulado en la gradiente vertical de un colector de desechos de camal. A partir de nueve estratos de fango residual de 15 cm de espesor, se procedió al análisis de la cantidad y calidad de biogás producido tanto por los nueve consorcios intactos como por las cepas bacterianas aisladas a partir de cada uno en medios específicos para microorganismos metanogénicos. Se obtuvieron 36 cepas bacterianas aisladas. No obstante, únicamente siete cepas provenientes de los dos estratos comprendidos entre los 90 y los 105 cm de profundidad y los consorcios intactos de los tres estratos entre 90 y 135 cm de profundidad fueron capaces de producir biogás. Solo dos cepas aisladas, F y G, provenientes de los estratos de 105 a 120 cm y de los 90 a los 105, respectivamente, y el consorcio intacto del estrato más profundo, α (105-120 cm), produjeron metano, pero en concentraciones superiores al 87% tras 28 días de incubación. Inóculos metanogénicos de todas las combinaciones posibles de estas dos cepas bacterianas y el consorcio α se evaluaron en términos de cantidad y calidad de biogás producido. El inóculo microbiano conseguido en base a la combinación F + α, alcanzó un porcentaje máximo de metano del 95,17%, superándose estadísticamente tanto la cantidad como la pureza del biogás generado por las cepas bacterianas y el consorcio intacto individualmente. Por tanto, la generación de inóculos metanogénicos a partir de cepas y consorcios metanogénicos eficaces puede contribuir a la optimización de los procesos de biodigestión, en un entorno vulnerable como el de las parroquias rurales del Noroccidente del Distrito Metropolitano de Quito.Item Open Access Análisis de diferentes medios y condiciones de cultivo en la composición del fitoplancton, con énfasis en cianobacterias(PUCE - Quito, 2024) Ortega Montero, Ana Gabriela; Astorga García, DianaLas cianobacterias, también conocidas como algas azules-verdes, son un grupo de bacterias fotosintéticas. Además de servir como indicadoras de la calidad del agua, tienen gran valor en la industria alimenticia, ambiental y farmacológica por ser fuente de sustancias de interés biotecnológico. La distribución de estos microorganismos es de tipo cosmopolita, su forma de vida es planctónica o bentónica, prefieren ambientes dulceacuícolas de aguas alcalinas a neutras con temperaturas entre 15 a 30 oC. En este estudio, se pusieron a prueba diferentes condiciones de cultivo para favorecer el crecimiento de la mayor diversidad cianobacteriana y microalgal a partir de una muestra compuesta de fitoplancton de arrastre de 0.5 m de profundidad. Tras la identificación de los taxones presentes en la muestra de procedencia, se inocularon los organismos fitoplanctónicos en 48 tratamientos. Se probaron dos medios de cultivo, BG11 y BG110, en tres consistencias, líquida, sólida y semisólida, dos fotoperiodos (12:12 y 18:6), tres pH (6, 7 y 10) y, exclusivamente en los medios líquidos, se probó presencia y ausencia de aireación. No se registró ningún taxon cianobacteriano en la muestra de procedencia, ni logró desarrollarse ninguno a partir de células de resistencia como los acinetos. Sin embargo, las condiciones de experimentación ensayadas permitieron cultivar todas las microalgas fitoplanctónicas de origen en medio BG11 sólido y semisólido. La diversidad microalgal estuvo distribuida en tres filos, siete familias y 11 géneros, sin diferencia entre consistencias, pero con el pH ácido como condicionante clave para la salud del cuerpo de agua natural en el contexto de cambio climático. Por ahora, los taxones presentes dan cuenta de aguas relativamente claras, de baja eutrofización y poco afectadas por actividades humanas. En cuanto a las mejores condiciones para favorecer el crecimiento algal in vitro, sobresalieron particularmente el medio BG11 en estado sólido, fotoperiodo 12:12 y pH alcalino.Item Open Access Caracterización del fitoplancton de los ecosistemas acuáticos del alto Antisana, provincia de Napo, Ecuador, en base a pigmentos fotosintéticos y feopigmentos(PUCE - Quito, 2020-06-05) García Arellano, Emilia Daniela; Astorga García, DianaLos ecosistemas acuáticos de alta montaña evidencian los efectos del cambio climático por el derretimiento de glaciares. Para comprenderlos, la investigación suele enfocarse en las alteraciones de las comunidades biológicas de microalgas, cianobacterias y macroinvertebrados. Particularmente, en los últimos años, se han realizado estudios sobre la composición de la comunidad planctónica de sistemas lénticos (lagos) de origen glaciar, pero es necesario replicar dichos estudios en sistemas lóticos (ríos), más todavía si éstos constituyen la base de la cuenca hídrica o son los principales aportantes de embalses de agua para consumo humano. El objetivo general del estudio fue caracterizar ecosistemas acuáticos de alta montaña de la Reserva Ecológica Antisana con diferente grado de influencia glaciar para la evaluación de la productividad de las comunidades microbianas de la zona mediante el análisis de pigmentos fotosintéticos y feopigmentos. Para ello, se monitorearon tres ríos de procedencia glaciar, tres de vertiente y tres de influencia mixta, en las dos temporadas climáticas características, seca y lluviosa, con dos muestreos cada una. Se midieron in-situ los parámetros fisicoquímicos de los ecosistemas y, posteriormente, en laboratorio, se examinaron sólidos en suspensión y nutrientes inorgánicos (nitrógeno amoniacal, nitrógeno total, nitratos, nitritos, sílice y fosfatos), y se cuantificaron clorofilas a, b, c y feopigmentos. Un análisis no paramétrico de Kruskal-Wallis fue necesario para caracterizar y comparar los parámetros ambientales dentro cada río a lo largo del tiempo, entre ríos de diverso origen por muestreo y por temporada y, entre tipos de río dentro de las tres intersecciones de interés. Se encontraron diferencias significativas en los parámetros fisicoquímicos entre ríos de distinto origen en términos de conductividad, turbidez, temperatura y concentración de oxígeno. En cuanto a nutrientes, la concentración de sólidos en suspensión fue mayor en ríos de glaciar, el nitrógeno inorgánico presentó diferencias entre ríos mixtos y de glaciar, y los nutrientes inorgánicos como fosfatos y sílice resultaron determinantes para las comparaciones examinadas. Sin embargo, las diferencias detectadas en las variables ambientales entre tipos de río no se tradujeron en concentración diferencial de pigmentos dentro de ríos de la misma procedencia, por muestreo ni entre temporadas como hubiera podido esperarse debido a su localización geográfica dentro de la cuenca. No obstante, en algunos ríos, pudieron observarse claros patrones de variación de la pigmentación en el tiempo. Todos los ríos presentaron los cuatro pigmentos analizados y pudo identificarse que corresponden a las divisiones Cyanobacteria, Ochrophyta, Charophyta y Chlorophyta.Item Open Access Caracterización fenotípica de microalgas y cianobacterias del fitoplancton de los embalses Succus y Mogotes(PUCE - Quito, 2022-02-18) Tipanta Betancourt, Johana Elizabeth; Astorga García, DianaEl fitoplancton reúne microalgas y cianobacterias que se encuentran suspendidas en la columna de agua de los sistemas acuáticos. Estos microorganismos han sido catalogados como bioindicadores por su sensibilidad ante fluctuaciones en su ambiente. En este estudio, se caracterizó fenotípicamente a los microorganismos fitoplanctónicos presentes en una temporada seca en los embalses Succus y Mogotes, que son parte de la fuente primaria de abastecimiento de agua de consumo humano para el Distrito Metropolitano de Quito. Cada embalse fue muestreado en febrero y abril de 2021 mediante arrastre superficial y muestreo estratificado a profundidades de 0.5, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35 y fondo menos 1 m. Se obtuvieron muestras por duplicado, una de las réplicas se preservó en campo y se destinó a la visualización directa del fitoplancton mediante la técnica de Utermöhl. La réplica viva se filtró para la concentración de biomasa y su posterior siembra en medio BG11 sin nitrógeno. Se logró establecer una línea taxonómica base conformada por 30 taxones en Succus y 39 en Mogotes, mayormente constituidos por los filos Bacillariophyta, Charophyta y Chlorophyta, descritos en su mayoría a nivel de orden, familia y género. La mayor parte de los taxones se obtuvieron a partir del arrastre superificial y/o el muestreo a 0.5 m. Ambos embalses compartieron 16 especies y su diversidad fue comparable a la de otros ecosistemas altoandinos de Ecuador y la región. Adicionalmente, se obtuvieron cuatro cultivos monoalgales, entre los que destacaron dos taxones no identificados por visualización directa. Los resultados expuestos proporcionaron diferencias en la distribución de taxones entre los perfiles de profundidad e información valiosa sobre taxonomía, diversidad y conservación de microorganismos fitoplanctónicos de la región. Destacaron, principalmente, aquellos catalogados como bioindicadores, pues permitieron deducir la tendencia de transición de los embalses de un estado oligotrófico a la mesotrofía. Este estudio se puede utilizar como una referencia base para futuros estudios, además de respaldar la importancia del biomonitoreo continuo de embalses someros altoandinos, debido a la biodiversidad dilucidada, que se traduce en una herramienta clave para la toma de decisiones de conservación, prevención y manejo de fuentes de agua cruda para las plantas de tratamiento.Item Open Access Caracterización fenotípica de microalgas y cianobacterias del fitoplancton del embalse La Mica(PUCE - Quito, 2021-01-13) Clavijo Páez, Katherin Andrea; Astorga García, DianaEl embalse La Mica es un embalse altoandino semi-artificial, considerado oligotrófico y de gran importancia por su aprovechamiento como fuente primordial de agua de consumo para diversas regiones de la ciudad de Quito. Por esta razón, resulta esencial la evaluación de los componentes microbianos indicadores de calidad de agua. Con el objetivo de determinar la diversidad de microalgas y cianobacterias del fitoplancton del embalse La Mica y su relación con el estado trófico del ecosistema y la calidad de agua para consumo humano, se realizaron tres muestreos en el centro del embalse en los meses de mayo, septiembre y octubre de 2019. En estas colectas, se tomaron muestras de la columna de agua en siete diferentes profundidades. Se obtuvieron 42 muestras, la mitad para visualización directa y la otra mitad para cultivo en medios semisólidos y se procedió a la caracterización fenotípica de microorganismos fotosintéticos mediante claves taxonómicas. Se identificaron 25 géneros clasificados en ocho divisiones. Entre estos, se definieron 14 géneros con mayor potencial como bioindicadores del estado del ecosistema.Item Open Access Caracterización fenotípica de microalgas y cianobacterias del perifiton de los ríos aportantes del embalse altoandino Mogotes (Parque Nacional Cayambe-Coca), Ecuador(PUCE - Quito, 2022-04-22) Jarre Saltos, Emilio Rafael; Astorga García, DianaMogotes es un cuerpo de agua altoandino natural ubicado en el Parque Nacional Cayambe-Coca. Sus aguas se aprovechan para el abastecimiento agua de consumo humano para el Distrito Metropolitano de Quito. Por tanto, conocer la diversidad taxonómica de microorganismos perifíticos resultaba de gran utilidad no solo para determinar la composición de las comunidades de microalgas y cianobacterias, sino para establecer biológicamente la calidad de sus aguas. La investigación conducida incluyó dos muestreos en el río aportante más importante, uno en febrero y otro en abril de 2021. Se obtuvieron muestras por duplicado de raspado de rocas, biopelículas de plantas semisumergidas y sedimentos. La mitad fue fijada en campo para la visualización microscópica directa y la otra fue utilizada para la siembra de biomasa en medio BG11 sin nitrógeno para el aislamiento y caracterización de cianobacterias. Se caracterizaron 31 géneros y 39 especies, distribuidas en siete filos, entre los que sobresalieron Bacillariophyta, Charophyta y Chlorophyta, distribuidos diferencialmente entre sustratos. Veinte taxones proporcionaron indicios sobre la calidad del ecosistema e incluyeron bioindicadores de diferentes estados tróficos simultáneamente. Sin embargo, la persistencia taxones intolerantes a contaminantes como nitratos, amonio o fósforo, demostraron que el sistema aún conserva atributos oligotróficos como aguas limpias y bien oxigenadas, de alta calidad potable, que se ven alteradas por efecto de las lluvias. Para futuros estudios y una toma de decisiones mejor sustentada, se recomienda el monitoreo periódico y sistemático de las comunidades de microalgas y cianobacterias perifíticas y fitoplanctónicas, simultáneamente, su composición, la abundancia relativa de sus taxones y las posibles fluctuaciones a lo largo del año y entre años.Item Open Access Caracterización fenotípica de microalgas y cianobacterias del Perifiton de los ríos aportantes del embalse La Mica(PUCE - Quito, 2021-01-14) Rodríguez Sabando, Karen Nicole; Astorga García, DianaLos microorganismos fotosintéticos que conforman el perifiton son importantes indicadores de contaminación y cambios ambientales en cuerpos de agua y su caracterización representa una herramienta útil para determinar el estado de estos ecosistemas. Con el objeto de caracterizar fenotípicamente las microalgas y las cianobacterias del perifiton en los aportantes y puntos periféricos del embalse altoandino La Mica, se realizaron dos muestreos: uno en septiembre y otro en octubre del 2019. El primero se enfocó en los ríos Alambrado, Moyas, Sarpache y Socavón, aportantes del embalse; y el segundo, en el dique, el muelle, rocas e islotes del embalse La Mica. Las muestras se analizaron mediante microscopía invertida de campo claro con lentes de aumento 40, 63 y 100X. Se utilizaron claves taxonómicas para la clasificación fenotípica de los especímenes a nivel de género y, en casos particulares, hasta especie. Se identificaron 61 taxones, entre los que sobresalieron 25 con potencial bioindicador de calidad de agua. La presencia de microalgas y cianobacterias intolerantes a la contaminación permite determinar, a nivel biológico, que el embalse La Mica y sus aportantes presentan aún un nivel bajo de contaminación orgánica e inorgánica, pero se advierten indicios de enriquecimiento.Item Open Access Caracterización funcional de consorcios microbianos metanogénicos presentes en un colector de desechos del camal ubicado en la parroquia de Pacto, Distrito Metropolitano de Quito, Ecuador(PUCE, 2018) Oscullo Enríquez, Mishell Alejandra; Astorga García, DianaLa digestión anaerobia es un bioproceso en que la materia orgánica produce metano, una fuente renovable de energía. En el proceso interviene una ruta metabólica fermentativa que involucra diferentes grupos funcionales microbianos en cascada. Se trata de microorganismos hidrolíticos, acetogénicos y metanogénicos que se deben caracterizar funcionalmente para conseguir un tratamiento sostenible y energéticamente aprovechable de residuos. Una cisterna anaerobia colmatada que acumula desechos de camal sin mezcla mecánica ni monitoreo, resulta un problema en un entorno natural vulnerable. Sin embargo, el análisis de la actividad microbiana en el ecosistema formado puede contribuir al aprovechamiento de estos desechos, mediante la determinación de los consorcios más activos en términos de degradación de los metabolitos intermedios, obtenidos de las fases más relevantes en la ruta metabólica de la metanogénesis: glucosa, correspondiente a la actividad hidrolítica; propionato, a la actividad acetogénica y acetato, a la actividad metanogénica. Así, mediante ensayos de funcionalidad, donde se evaluó la velocidad máxima de consumo de estos metabolitos por espectrofotometría, se determinaron por triplicado las actividades hidrolítica, acetogénica y metanogénica específicas del fango residual en la gradiente de profundidad de la cisterna, y se determinaron estadísticamente los estratos funcionalmente más activos. Los resultados evidenciaron la estratificación de la actividad funcional a lo largo de la gradiente de profundidad, donde la mayor actividad hidrolítica se localizó en los dos estratos más profundos, los potenciales acetogénicos más altos correspondieron a dos estratos intermedios y los metanogénicos, al central, exclusivamente. Por tanto, una combinación de consorcios provenientes de diferentes estratos con la mayor actividad funcional potenciaría el aprovechamiento energético de estos fangos residuales: una alternativa de gestión enfocada en la sostenibilidad socio-productiva.Item Open Access Evaluación de medios de cultivo alternativos para la producción de biomasa de Haematococcus pluvialis(PUCE - Quito, 2023-01) Villamarín Hidalgo, Sharon Carolina; Astorga García, DianaHaematococcus pluvialis es una microalga verde unicelular, con forma elipsoide y mótil durante su fase verde. En condiciones de estrés (fase roja), pierde su movilidad, las células se enquistan y producen el ketocarotenoide conocido como astaxantina. Debido a la importancia económica de este metabolito, el complejo ciclo de vida algal y su lento crecimiento, se emplean equipos y medios de cultivo costosos para favorecer la producción de biomasa. Por tanto, el objetivo del presente estudio fue evaluar medios de cultivo alternativos para la maximización de la biomasa en la fase verde de esta microalga, así como optimizar las condiciones de su cultivo a escala laboratorio. Se examinaron dos medios de cultivo alternativos, Extracto de Rosas y Fuerza Verde, y se los comparó con el medio comercial (M1B5). En la búsqueda de la optimización de las condiciones de cultivo, bajo un fotoperiodo de 12 horas de luz y 12 horas de oscuridad y temperatura ambiente, se analizaron dos fuentes de luz, luz solar y luz LED (75 µmol de fotones m-2 s-1) y se revisó la importancia de la presencia o ausencia de aireación. El fertilizante Fuerza Verde resultó un medio económico y efectivo para el cultivo de la fase verde de H. pluvialis: permitió alcanzar mayor tamaño celular, alargó la fase de crecimiento exponencial y culminó con el mismo rendimiento que el medio comercial en menor tiempo, además de proporcionar nutrientes adicionales. El Extracto de Rosas, por el contrario, no fue recomendable. Adicionalmente, la luz solar propició un mejor crecimiento de H. pluvialis que la luz blanca, tanto en condiciones de aireación como en su ausencia. No obstante, Fuerza Verde permaneció como excelente opción al medio comercial si la fuente de luz disponible fue LED. Finalmente, la aireación para H. pluvialis mótil es un factor predisponente para el mejor aprovechamiento de los nutrientes independientemente del medio de cultivo empleado. En resumen, puede afirmarse que Fuerza Verde es una alternativa accesible, menos costosa y muy efectiva para el cultivo de H. pluvialis a escala de laboratorio, especialmente si se usan luz solar y aireación para maximizar la biomasa monoalgal y minimizar la contaminación.Item Open Access Identificación taxonómica de las especies de cianobacterias y microalgas del embalse Salve Faccha, perteneciente a la Red de Agua Potable Papallacta, Parque Nacional Cayambe-Coca, Cordillera Real del Ecuador(PUCE - Quito, 2019-12-31) López Valdivieso, Kelly Nicole; Astorga García, DianaEl embalse Salve Faccha es una importante fuente de abastecimiento de agua para el Distrito Metropolitano de Quito. La comprensión de la dinámica de este ecosistema frente a cambios ambientales naturales y antropogénicos cobra especial relevancia en el contexto ambiental actual. Las microalgas y las cianobacterias juegan un papel primordial, al constituir la base de la cadena trófica, de manera que cualquier alteración en la composición poblacional que se produzca a este nivel por cambios ambientales afecta a todo el ecosistema. En esta investigación, se identificó taxonómicamente a estos productores primarios del embalse durante la época de menor precipitación e inicios de la temporada de lluvias, correspondiente a los meses de mayo, junio, julio y agosto del 2018, durante los monitoreos mensuales realizados por el Laboratorio de Control de Calidad del Agua de la Empresa Publica Metropolitana de Agua Potable y Saneamiento (EPMAPS). Las muestras de fitoplancton se tomaron a diferentes profundidades, en función de la profundidad del embalse al momento del monitoreo. Se tomaron, además, muestras de arrastre con una red de fitoplancton de 24 µm de poro. La identificación taxonómica se realizó mediante visualización directa al microscopio, con claves taxonómicas y, en el caso de cianobacterias, mediante su caracterización en medios de cultivo específicos. Se identificó un total de 48 taxones en el embalse, en la época en que se presenta alta productividad y las especies se desarrollan ampliamente. Entre los taxones identificados, algunos géneros y especies actúan como bioindicadoras de polución orgánica que proporcionan una idea acerca del estado trófico del embalse. Las cianobacterias que pudieron aislarse en medios de cultivo no se han reportado anteriormente en el embalse, debido a que las condiciones ambientales del ecosistema no han permitido que éstas abandonen su estado vegetativo, a pesar de encontrarse presentes. La caracterización de las mismas ha permitido conocer la diversidad de cianobacterias presente y las potenciales alteraciones en la composición fitoplanctónica que podrían surgir ante cambios ambientales bruscos que involucren aumento de temperatura y mayor enriquecimiento del ecosistema, como en los escenarios de calentamiento global.