Browsing by Author "Flores Corella, Katherine Polet"

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    Determinación de Xanthomonas phaseoli pv. manihotis como causante de la enfermedad bacteriosis vascular en yuca (Manihot esculenta) en la región Oriental del Ecuador
    (PUCE - Quito, 2020) Flores Corella, Katherine Polet
    En los últimos años, la yuca (Manihot esculenta) ha llegado a convertirse en uno de los cultivos más importantes en regiones tropicales del Ecuador, debido a su alto contenido proteico y energético, siendo este el cuarto cultivo más importante del mundo después del arroz, el maíz y el trigo. Sin embargo, este cultivo es susceptible a muchas enfermedades poco estudiadas en el país, especialmente, las ocasionadas por microorganismos como las bacterias. Por tanto, el presente estudio busca determinar la presencia de Xanthomonas phaseoli pv. manihotis, causante de la bacteriosis vascular en yuca, en el Ecuador. Para ello, se tomaron muestras al azar de dos localidades del Oriente ecuatoriano, donde se seleccionaron hojas que presentaban manchas angulares, sintomatología característica de esta enfermedad bacteriana. Las muestras fueron analizadas en el laboratorio de Fitopatología y Control Biológico de la PUCE, donde se realizó el aislamiento y purificación del patógeno mediante técnicas microbiológicas, utilizando medio LPGA e incubando a 28 °C. Las bacterias analizadas microscópicamente, mediante tinción Gram, mostraron ser bacilos Gram negativos, mientras que macroscópicamente, las colonias presentaron un color crema con apariencia mucoide. La técnica de PCR convencional fue utilizada para la identificación molecular utilizando los primers específicos rpoB y Cterm, los cuales producen amplicones de 944 pb y 577 pb respectivamente. Los productos de PCR resultantes fueron enviados a secuenciar a la empresa Macrogen, Corea del Sur y las secuencia consenso obtenidas, coincidieron con Xanthomonas phaseoli pv. manihotis al 98.70% de identidad, con un valor E de 0. Finalmente, se realizaron los postulados de Koch, donde se inoculó una suspensión bacteriana de 108 UFC obtenidas a partir de la bacteria aislada del campo. Después de 15 días, las manchas angulares típicas de esta enfermedad aparecieron en las hojas, las cuales fueron nuevamente analizadas, logrando aislar la bacteria en medio LPGA. Lamentablemente, debido a la pandemia por Covid19 y la consiguiente falta de seguridad para realizar la última identificación molecular, reportamos que, los resultados no son concluyentes, por tanto, este estudio no puede afirmar que, la bacteria encontrada en planta es la causante de bacteriosis vascular en el Ecuador.